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基因工程重组乙型脑炎病毒E蛋白作为候选疫苗和诊断抗原的实验研究

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第一部分乙型脑炎病毒DNA疫苗和基因工程亚单位疫苗的动物保护实验研究

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材料与方法

结果

讨论

第二部分乙型脑炎病毒E蛋白在巴斯德毕赤酵母中的表达与鉴定

前言

材料与方法

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材料与方法

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摘要

乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)是由蚊虫传播的引起人类或动物的中枢神经系统感染的病毒性疾病.由于JE病死率高,后遗症较重;灭活疫苗缺乏长效免疫,必须多次加强接种,费用较高,且有可能导致过敏反应;减毒活疫苗有毒力回复的潜在危险使其未能被国外接受,因此,新型JE疫苗的研制仍倍受关注. 该教研室曾构建了3种重组JE疫苗:(1)重组杆状病毒在昆虫细胞Sf9中表达的携带JEV E蛋白的HIV-1 gag病毒样颗粒(VLPs),(2)在果蝇细胞S2中表达的含JEV E蛋白的胞外颗粒(EPs)以及(3)以真核表达载体pVAX1为基础的含JEV PrM/E的DNA疫苗(pV/JE).我们用小鼠模型比较评价以上3种疫苗诱发动物产生抗JEV细胞和体液免疫水平以及动物保护效果.BALB/c小鼠经2次接种疫苗后,测定其病毒特异性的CTL活性、结合抗体、中和抗体及JEV攻击保护实验.结果表明各新型疫苗组的CTL活性为33﹪~56﹪,灭活疫苗组为22﹪,而载体和PBS对照组的CTL活性分别为17﹪和18﹪.一次免疫后,实验组小鼠血清结合抗体阳转率为90﹪.

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