抗融合标签单克隆抗体的制备、鉴定与应用研究

摘要

该实验中,我们制备了7 株稳定分泌抗Ig融合蛋白Fc段单克隆抗体的杂交瘤细胞株FMUFc1~7,其中FMUFc2、FMUFc4、FMUFc5和FMUFc6为IgG1(κ);FMUFc1、FMUFc3及FMUFc7为IgG2b(κ).在表位分析的基础上,我们利用FMUFc4作为包被抗体,HRP-FMUFc5作为酶标记抗体,构建了用于检测Ig融合蛋白的双单抗夹心ELISA系统,并通过选择包被抗体和酶标抗体的最佳工作浓度对其进行了优化.利用FMUFc5 mAb制备的亲和层析柱,对转染后COS-7细胞培养上清的LAIR-1-Ig融合蛋白进行纯化,纯化产物经SDS-PAGE后显示层析所得蛋白质的分子量与理论值相符,纯度大于80﹪.这说明免疫亲和层析能够有效的纯化培养基中的Ig融合蛋白,为Ig融合蛋白纯化提供了新的有效途径.

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英文缩写

前言

文献回顾 标签融合蛋白及其单克隆抗体的研究进展

一、标签融合蛋白和融合标签

二、标签融合表达的优点

三、表达标签融合蛋白的策略

四、标签融合蛋白的纯化与切割

五、标签融合蛋白的应用

六、抗融合标签单克隆抗体的应用

研究内容

第一部分：抗融合标签单克隆抗体的制备、鉴定与应用研究

一、抗Ig融合蛋白单克隆抗体的制备、鉴定与应用研究

二、抗GST、His以及FLAG单克隆抗体的鉴定与初步应用

小结

致谢

参考文献