乙型肝炎病毒前C/C和前S/S基因异质性及其与宫内感染关系的初步研究

摘要

该研究运用分子生物学的技术方法，结合临床与流行病学的资料，分析HBV基因的变异,初步筛选了可能与宫内感染有关的特异性基因结构，探讨了HBV基因异质性与宫内感染的可能关系，从而为阻断HBV的宫内传播提供理论依据.方法:①1997年8月~1995年5月和2001年8月~2002年1月收集陕西省妇幼保健院妇产科足月分娩的HBsAg阳性孕妇及其新生儿外周血,共70对.根据新生儿发生宫内感染与否,将其母亲分为宫内感染组织和未感染组.同时还收集到1例孕中期限引产的HBsAg阳性孕妇血清和引产胎儿肝脏.②提取血清中HBV DNA,扩增宫内感染组4对母婴和未感染组5例母亲HBV2.5kb或1.2kb基因片断,PCR 产物纯化后克隆入Puc19载体,经PCR、酶切和测序鉴定,共得到63株HBV序列.③采用Megalign软件对全部HBV株前C/C基因前S/S基因序列进行分析,确定基因亚型和血清亚型,构建种系进化树,比较各基因区的差异性.④比较发生宫内感染的4对母婴HBV序列间基因位点的不同,基因差异性的高低以及种系进化关系.⑤分别比较宫内感染组新生儿和未感染组母亲、宫内感染组母亲和未感染组母亲之间核苷酸序列、氨基酸序列的羞异.⑥护增引产孕妇HBV2.5kb基因片断和引产胎肝中HBV S区500bp基因片断,克隆后各选取一株母胎序列进行相似性分析,产同其它序列的变异位点进行比较.结论:①母体内的优势株和弱势株都可以通过宫内传播感染新生儿,可能是单株感染也可能是混合感染.母体的优势株和新生儿体内的优势株不一定相同.提示HBV的宫内感染存在选择性.②发行宫内感染的HBV株,在nt3021、nt293、nt 483、nt797和 nt1827 、nt2909、 nt399、nt811、 nt817位点突变很少或没有.提示不具有上述突变的HBV株可能具有选择优势,容易引起新生儿宫内感染.③HBV不同区域的变异对病毒本身结构和功能的影响不尽相同,从而对宫内感染的发生与否可能产生不同的效应.

目录

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摘要

常用缩写词中英文对照表

前言

第一部分HBsAg阳性孕妇及其新生儿HBV前C/C和前S/S 基因结构分析

一、研究对象及方法

(一)标本来源

(二)试剂与材料

(三)方法

二、结果

三、讨论

第二部分HBV前C/C和前S/S基因异质性与宫内感染的关系

一、研究对象和方法

(一)序列来源

(二)宫内感染的判定标准

(三)方法

二、结果

三、讨论

小结

参考文献

文献回顾：乙型炎病毒前C/C区和前S/S区基因突变及其生物学意义

1.前C/C区基因突变

2.前S/S区基因突因

参考文献

致谢

个人简历

攻读硕士期间发表的文章