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鸟苷酸交换因子Vav1与核基质蛋白MINT相互作用的初步研究

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文献回顾

1.实验材料

2.实验方法

2.1.酵母双杂交系统中质粒构建及相互作用检测

2.2.Vav1全长分子的克隆构建

2.3.免疫共沉淀

3.实验结果

3.1.酵母双杂交验证MINT-F1与Vavl-C端相互作用并对其具体作用区域的初步探讨

3.2.Vavl全长分子的获得

3.3.哺乳动物细胞内Co-IP确证MINT-F1与Vavl的相互作用

4.讨论

小结

参考文献

个人简历及研究成果

致谢

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摘要

本研究分析了Vav1与MINT的相互作用。诱饵质粒由MINT-F1~F6各片段克隆在载体pGBKT7,根据Vav1分子的结构域分布对Vav1-C段做了相应的截短,不同的片断分别克隆在载体pGADT7或pACT2中。探讨了它们之间的相互作用并进行了验证。最后克隆构建了Vav1的全长分子后,通过免疫共沉淀方法,在哺乳动物细胞中验证了Vav1全长分子与MINT的F1有明确的相互作用。此结果为深入理解MINT的在淋巴细胞分化和激活中的作用与其机制提供了重要的线索。

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