隐球菌性脑膜炎诊断的新标准-MGG染色法

摘要

背景:隐球菌性脑膜炎(cryptococcal meningitis,CM)是一种严重危害人类健康的中枢神经系统真菌感染性疾病,其预后差,死亡率高。近年来,由于免疫抑制剂、广谱抗生素、糖皮质激素的广泛使用,颅内有创检查、器官移植及AIDS的流行,CM的发病率有明显上升趋势。CM的临床表现多种多样,如:头痛、发热、恶心呕吐、脑膜刺激征、锥体束征、精神症状及癫癎等。发病可呈急性、亚急性、慢性过程。CM临床诊断比较困难,头颅CT和MRI检查对CM缺乏特异性,仅可检测到与隐球菌相关的颅内占位性病变,如肉芽肿、脑囊肿,以及脑水肿、脑积水等表现。胸部X线检查可见肺门淋巴结斑片状或粟粒样浸润、空洞或胸膜渗出等,但容易与结核病灶、肺炎样改变及肺占位性病变等混淆。目前确诊主要依靠脑脊液中病原体检测。实验室方法有墨汁染色法、阿利新兰染色法、PAS染色法,真菌培养,ELISA、乳胶凝集试验及抗体检测单克隆抗体等,还有(1,3)-β-D-葡聚糖(G)试验、半乳甘露聚糖(GM)试验及其他分子生物学方法等。但是上述方法均因存在检测阳性率低,操作过程复杂,价格昂贵,有一定的假阳性和假阴性等缺点,不能满足临床需要,因此探索一种更好的方法非常必要。MGG(May-Grunwald-Giemsa)染色法国外被广泛使用,我院亦在1975年开始应用于细胞学检测,包括对隐球菌的检测。但是目前MGG染色法用于诊断CM的特异性和有效性尚无定论。
　　目的:研究MGG染色法在诊断CM中的应用价值,以确立一种新的CM诊断标准。
　　方法:我们回顾性分析了我院从1989年6月-2008年9月20年中收治的37例确诊为CM住院患者的一般资料及诊断情况。其中男性29例,女性8例,14例合并基础病变。年龄从3岁-63岁,平均28.7岁。入院前21例患者存在误诊情况。所有病例均采用脑脊液玻片离心沉淀法收集细胞,进行脑脊液细胞学计数、MGG染色。以镜下看到单个或呈簇排列,菌体圆形或类圆形,直径5-15um左右,染色呈蓝色,无核夹膜染色深,周边辐射状毛刺分布的病原体为确诊CM标准。比较MGG染色法及墨汁染色法在检出隐球菌阳性率中的差别。
　　结果:脑脊液白细胞计数3例患者正常,34例患者增高。细胞学分类淋巴细胞为主混合细胞型27例,中性粒细胞为主混合细胞型5例,单核细胞为主型5例。墨汁染色法隐球菌阳性30例(82％),MGG染色法隐球菌阳性37例(100％)。
　　结论:脑脊液MGG染色方法诊断CM的阳性率明显高于当前普遍认可的金标准——墨汁染色法。此方法具有操作简便、时间短暂、检出率高、价格低廉的优点,且可动态观察脑脊液细胞学的变化及时了解药物疗效。因此,我们提出MGG染色法可作为诊断CM的新标准。

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