99mTc-NGR-IFN-α2a在荷瘤小鼠模型体内分布及显像的研究

摘要

目的:研究血管靶向性多肽复合物NGR-干扰素-α2a（NGR-interferon-alpha2a;NGR-IFN-α2a）的放射性核素标记方法，并观察其在荷瘤SCID鼠体内的动态分布及显像。
　　方法:
　　1、以双半胱氨酸(L,L-ethylenedicystein,EC)作为双功能螯合剂合成EC-NGR-IFN-α2a,以MDP作为转移螯合剂，采用二步法对EC-NGR-IFN-α2a进行99mTc标记，制备99mTc-NGR-IFN-α2a，并测定其标记率、放射化学纯度（RCP）及对标记和非标记的EC-NGR-IFN-α2a进行生物学活性鉴定；
　　2、建立肝癌MHCC97-H细胞SCID小鼠皮下移植瘤模型，取模型小鼠21只，分为7组，3只/组，尾静脉注射7.4MBq(0.2mL)，分别于注射后1、2、4、6、8、12、24h各处死1组小鼠，取血、主要脏器及肿瘤组织，称重并测量放射性计数，经物理衰变校正后计算每克组织百分注射剂量率(％ID／g)，以肿瘤组织为靶组织（T），其它组织为非靶组织（NT），计算不同时间点T/NT；
　　3、取3只荷瘤小鼠，尾静脉注射99mTc-NGR-IFN-α2a7.4MBq(0.2mL)，分别于注射后0.5、1、2、4、6、8、12、24h行SPECT静态显像，采用感兴趣区（ROI）技术，选取骨骼、肌肉组织作为NT，计算不同显像时间点的T/NT值。
　　结果:
　　1、NGR-IFN-α2a与EC的螯合及标记：EC-NGR-IFN-α2a螯合率为87％，标记率86％，放化纯度96％，99mTc-NGR-IFN-α2a在室温下放置0、30min，1、2、4和24h后的放化纯度分别为96.2％±0.4％、93.0％±0.7％、89.8％±0.6％、82.0％±0.8％、70.8％±0.8％和49.0％±0.9％；含NGR-IFN-α2a、EC-NGR-IFN-α2a、99mTc-NGR-IFN-α2a三组Wish细胞之间的OD值相比较，P值分别为0.685、0.887、0.585。
　　2、体内分布：99mTc-NGR-IFN-α2a注射后4h荷瘤小鼠心血池内放射性计数明显下降，注射后1h肾脏放射性逐渐增加，2h消化道放射性开始逐渐增加，肿瘤摄取高峰期在注射后4h，并可持续至24h，靶组织(T)/非靶组织(NT)最高可达26.5，平均14.9。
　　3、移植瘤模型显像：尾静脉注射99mTc-NGR-IFN-α2a7.4MBq(0.2mL)，在矩阵128×128，Zoom1.33，每帧采集200k计数的条件下，瘤体在注射后0.5h开始显影，注射后2～8h显影最清晰，24h仍可见肿瘤显影，通过感兴趣区（ROI）技术得到T/NT值为可达14.5，平均9.8。
　　结论:
　　1、螯合EC-NGR-IFN-α2a的过程简便易行，反应条件温和，螯合率较高，标记NGR-IFN-α2a的条件简单，标记率及放化纯度均较高，在与EC螯合后及放射性核素标记后对NGR-IFN-α2a复合物的生物学活性均无明显影响，标记物在体外较稳定。
　　2、99mTc-NGR-IFN-α2a在荷瘤小鼠血液内清除迅速，主要经肠道和肾脏排泄，肿瘤组织摄取率高，且在肿瘤组织内停留时间长。
　　3、99mTc-NGR-IFN-α2a在荷瘤小鼠体内特异性高、靶向性好、T/NT比值高。研究结果表明放射性核素标记的NGR-IFN-α2a有望成为一种肿瘤血管靶向性的诊断与治疗药物。

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前言

文献回顾

一、 NGR 的研究进展

二、 双功能螯合剂的研究现状

三、 干扰素及其在肿瘤治疗中的应用

四、 放射性核素靶向显像与治疗

正文

第一部分 99mTc 间接标记 NGR-IFN-α2a 的研究

1 材 料

2 方 法

3 结 果

讨 论

第二部分 99mTc-NGR-IFN-α2a 在荷瘤小鼠模型体内分布及显像的研究

1 材 料

2 方 法

3 结 果

讨 论

小结

参考文献

致谢