小花草玉梅化学成分研究

摘要

小花草玉梅(Anemone rivularis var.flore-minore Maxim.)属于毛茛科(Ranunculaceae)银莲花属(Anemone)，为多年生草本植物。别名：山辣椒（陕西）、白头翁（甘肃）、破牛膝（宁夏），生长于海拔900～3000m的山坡湿地、山地林边或草坡上，分布于华北、西北及辽宁、河南、四川等省区，秦岭南北坡均有大量分布，来源易得。民间以其全草或根状茎入药，《中国植物志》记载小花草玉梅“根状茎药用，治疗肝炎、筋骨疼痛等症”。
　　目前关于小花草玉梅的研究主要集中在形态学方面，其化学成分和药理作用的研究尚未见报道。通过文献检索，其同属植物中主要含三萜皂苷类成分。在对小花草玉梅粗提物进行抗肿瘤(BEL-7402,HeLa)活性筛选后，发现其具有一定的肿瘤细胞毒性(LD50分别为176.3μg/ml和183.2μg/ml)。本文主要围绕小花草玉梅的化学成分展开研究，利用硅胶柱层析、开放ODS柱层析、SephadexLH-20凝胶柱层析、制备高效液相色谱等多种分离纯化手段从小花草玉梅全草的水饱和正丁醇层萃取物中分离出16个化合物，利用ESI-MS,1H-NMR,13C-NMR,DEPT135,HSQC,HMBC,1H-1HCOSY,NOESY,TOCSY等方法并结合化学手段鉴定了其中15个化合物的结构，分别为：
　　3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-齐墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)；3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)；3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)；3-O-β-D-吡喃核糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)；3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂苷元(6)；常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)；3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂苷元-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)；3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-齐墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)；3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂苷元-28-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(10)；3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-丝石竹皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(11)；常春藤皂苷元-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(12)；3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-齐墩果酸(13)；13(S)-羟基-7-氧-半日花烷-8,14-二烯-19-酸-β-D-半乳糖酯苷(14)；(7S,8R,7'R,8'S)4,9,4',7'-四羟基-3,3'-二甲氧基-7'-O-正丁基-7,9'-四氢呋喃9-O-β-D-葡萄糖苷(15)；常春藤皂苷元(16)。
　　其中，化合物14,15,11为新化合物，化合物11,12,14,15为首次从银莲花属植物中分离，所有化合物均为首次从小花草玉梅中获得。上述工作填补了小花草玉梅化学成分的空白，丰富了银莲花属植物的化学成分，为小花草玉梅的化学分类提供了参考数据。
　　本文分离的主要成分与银莲花属植物的特征性成分(齐墩果烷型三萜皂苷)相吻合，首次从化学成分角度证实小花草玉梅归属于银莲花属。同时，经文献检索，二萜苷类化合物(14)和木脂素苷类化合物(15)此前没有在银莲花属中分离的报道，体现了小花草玉梅作为一个变种(银莲花属植物草玉梅的变种)的特殊性。
　　对部分单体化合物进行BEL-7402和HeLa细胞毒性测试，结果显示，化合物6,13具有明显的抗肿瘤活性，并结合实验结果初步对构效关系进行了推测，为以后进行药用开发提供了参考数据。

目录

封面

声明

目录

缩略语表

中文摘要

英文摘要

前言

文献回顾

1 化学成分

2 药理活性

正文

一 小花草玉梅化学成分的提取与分离

1.1 药材提取

1.2 正丁醇部位的分离

1.3 从小花草玉梅中分离得到的化合物编号和结构

二 小花草玉梅化学成分结构鉴定

2.1 新化合物结构鉴定

2.2 已知化合物鉴定

三 实验部分

3.1 实验仪器与材料

3.2 植物材料

3.3 结构鉴定数据

3.4 化合物核磁数据表

四 抗肿瘤生物活性体外筛选实验

4.1 实验材料

4.2 实验方法

4.3 实验结果

4.4 讨论

小结

参考文献

个人简历

致谢

附录