腺相关病毒共表达血管生成肽(PR39)与血管扩张肽(ADM)对大鼠脑缺血再灌注损伤作用的研究

摘要

目的： 探讨重组腺相关病毒携带双基因:抗菌肽（ PR39）和肾上腺髓质素（Adrenomedullin，ADM），即rAAV-PR39-ADM对大鼠脑组织缺血/再灌注损伤的保护和治疗作用。 方法： 离体实验：人脐静脉内皮细胞培养，行细胞增殖和血管成型实验。在体实验：建立大鼠（SD大鼠）脑缺血-再灌注（Ischemia/ reperfusion, I/R）模型（脑缺血2 h后再灌注）。SD大鼠随机分为：Sham组，生理盐水组（I/R+NS），空病毒组（I/R+AAV）及治疗组（I/R+rAAV-PR39-ADM组）。I/R组，再灌注24小时后股静脉分别给予等量生理盐水、空病毒及rAAV-PR39-ADM。术后1周，2周，3周和4周，行头颅 MRI、神经功能缺损评分、TTC染色及 HE染色等方法评价rAAV-PR39-ADM对脑缺血再灌注损伤的疗效。 结果： 离体实验中，rAAV-PR39-ADM同对照及空病毒组相比，有明显的促细胞增殖和促血管成型作用。在体实验中，头颅MRI检查证实模型制备成功。与Sham组比较，实验各时间点I/R组的神经功能缺损评分及脑梗死的体积均明显增高（P<0.01）, I/R组术后即刻的神经功能缺损评分无统计学差异（P>0.05）。与生理盐水组及空病毒组相比，治疗组各时间点神经功能缺损评分及梗塞体积均明显减小（P<0.01）,空病毒组与生理盐水组对比梗塞面积及神经功能缺损评分无统计学差异（P>0.05）。HE染色显示，治疗组的神经元细胞数目与生理盐水组和空病毒组相比明显的丰富，缺血区新生血管明显增多。 结论： rAAV-PR39-ADM可能通过促进细胞增殖、促血管新生，改善脑缺血再灌后局部供血及侧支循环，保护神经元，促进缺血半暗带区血管再生，减轻缺血再灌注脑损伤。

目录

声明

缩略语表

前言

文献回顾

实验

1 材料

1.1 细胞增殖及血管形成实验

1.2 实验动物与分组

1.3 工作条件

1.4 主要材料

2 方法

2.1 CCK8细胞增殖实验

2.2 血管形成实验

2.3 大鼠脑缺血再灌注模型的制备

2.4 动物实验给药方式

2.5 脑梗死面积测定

2.6 组织病理学检测

2.7 统计学方法

3 结果

3.1 CCK8细胞增殖实验结果

3.2 血管形成实验结果

3.3 磁共振验证模型制备成功[91]

3.4 神经功能缺损评分比较

3.5 脑梗塞体积比较

3.6 HE染色病理学检测

4 讨论

小结

参考文献

附录1

附录2

个人简历及研究成果

致谢