康宁霉素对蝴蝶兰灰霉病菌的防治机理研究

摘要

木霉是一类重要的生防菌,Peptaibols是一类富含α-氨基异丁酸(α-aminoisobutyric acid, Aib)的特殊抗菌肽,具有广谱杀菌作用,对某些真菌、原生动物,耐药性细菌都有杀灭作用。蝴蝶兰灰霉病是近几年来在园艺植物上危害比较严重的一种病害。本文以拟康氏木霉生防菌株SMF2分离得到的一种新的peptaibols抗菌肽——康宁霉素(trichokonins, TKs)为研究对象,以蝴蝶兰灰霉病菌为供试病原菌,研究了康宁霉素对蝴蝶兰灰霉病的防治机理。结果如下:
　　1.蝴蝶兰灰霉病的病原菌为灰葡萄孢菌(Botrytis Cinerea),属于半知菌亚门,丝孢目。
　　单孢分离蝴蝶兰灰霉病菌,采用形态学和分子生物学手段相结合对其进行鉴定。结果表明,蝴蝶兰灰霉病菌的有性态和无性态分别与GenBank中报道的富克尔核盘菌(Botryotinia fuckeliana)、灰葡萄孢菌(Botrytis Cinerea)同源性均达到99.8％,结合形态学特征确定蝴蝶兰灰霉病病原菌有性态为富克尔核盘菌(Botryotinia fuckeliana),属于子囊菌亚门,柔膜菌目。无性态为灰葡萄孢菌(Botrytis Cinerea),属于半知菌亚门,丝孢目。
　　2.康宁霉素对蝴蝶兰灰霉病的防治机理主要包括三个方面:杀菌作用、诱导抗病性、促进植物生长。
　　测定了康宁霉素对蝴蝶兰灰霉病菌菌丝生长、孢子萌发、菌核生长及菌核萌发、菌丝可溶性蛋白含量、菌丝电导率和内溶物的影响。结果表明,康宁霉素能抑制灰霉病菌的菌丝生长、孢子及菌核萌发,使病原菌细胞膜的渗透性增加,可溶性蛋白含量减少。
　　测定了康宁霉素诱导后蝴蝶兰叶片中POD、PPO、PAL等防御酶活性的变化, SOD、CAT、MDA抗性相关酶含量的变化,病程相关的β-1,3-葡聚糖酶、几丁质酶的活性变化。结果表明康宁霉素诱导处理能提高蝴蝶兰叶片内POD、PPO、PAL、SOD、CAT等防御酶及抗性相关酶的活性,降低有害物质MDA的含量。康宁霉素诱导处理后病程相关的酶活性也有所增加。
　　实验过程中发现施用康宁霉素后,蝴蝶兰的生长与对照相比明显旺盛,地上部和地下部的生物量都有所增加,根系的各项指标也有不同程度的加强。
　　3.康宁霉素对蝴蝶兰灰霉病具有较好的防治效果,并建立了康宁霉素诱导蝴蝶兰抗灰霉病技术体系。
　　测定了离体条件和盆栽条件下康宁霉素对蝴蝶兰的杀菌与抑菌效果,结果表明,康宁霉素的杀菌效果较嘧霉胺弱,但持效期比嘧霉胺长,抑菌效果比较明显。既可喷施也可灌施,杀菌时喷施效果好,抑菌时灌施效果好。
　　构建了康宁霉素诱导蝴蝶兰抗灰霉病技术体系。康宁霉素诱导接种的最佳浓度为0.2 mg/L;灌根诱导的相对防效较好;诱导接种和挑战接种间隔为1 d和3 d时,康宁霉素诱导抗性效果较好;诱导处理的生长发育越早,其诱导作用越显著。

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前言

第一章 绪 论

1.1 植物病害生防防治及生防制剂

1.2 木霉及Peptaibols抗菌肽

1.3 植物诱导抗病性研究概况

1.4 蝴蝶兰灰霉病概述

1.5 本论文选题背景、研究目的意义和研究内容

第二章 蝴蝶兰灰霉病菌的分离及鉴定

2.1 实验材料及仪器

2.2 实验方法

2.3 结果与分析

2.4 结论与讨论

第三章 康宁霉素对蝴蝶兰灰霉病菌的抑菌活性及机理

3.1 实验材料及仪器

3.2 实验方法

3.3 结果与分析

3.4 结论与讨论

第四章 康宁霉素对蝴蝶兰灰霉病的防治效果与诱抗体系建立

4.1 实验材料及仪器

4.2 实验方法

4.3 结果与分析

4.4 结论与讨论

第五章 康宁霉素对蝴蝶兰灰霉病的诱导抗病性机制

5.1 实验材料及仪器

5.2 实验方法

5.3 结果与分析

5.4 结论与讨论

第六章 康宁霉素对蝴蝶兰生长发育的影响

6.3 结果与分析

6.4 结论与讨论

结语

参考文献

附录

致谢

攻读学位期间发表的学术论文及参加的项目