卵巢癌患者CD4+CD25+调节性T细胞的测定以及与细胞因子关系的研究

摘要

目的：探讨卵巢癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞在CD4+T细胞的分布，分析CD4+CD25+调节性T细胞、CD44与卵巢癌患者临床病理学特征的关系；研究CD4+CD25+调节性T细胞与Th1、Th2类细胞因子、CD44、CA199、CA125的相关性。 方法：流式细胞仪测定53例卵巢癌患者、44例卵巢良性疾患、45例健康人外周血CD4+CD25+调节性T细胞、CD44的比例；Th1类细胞因子白介素-2(IL-2)、γ-干扰素(INF-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)；Th2类细胞因子白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)的水平；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测卵巢癌患者血清中的CA199、CA125的水平。 结果：(一)：卵巢癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(21.95±6.80)％、CD44的比例(128.45±34.72)％明显高于卵巢良性疾患(12.57±5.12)％、(83.75±19.49)％和健康对照组(10.77±3.02)％、(79.92±21.83)％，(均P<0.001)良性疾患与健康对照组无差异；手术前的卵巢癌患者CD4+CD25+调节性T细胞(21.95±6.80)％、CD44比例(128.45±34.72)％明显高于手术后的患者(16.41±5.84)％、(103.41±37.25)％，(均P<0.001)。 (二)：CD4+CD25+调节性T细胞、CD44与患者的年龄、职业没有关系；卵巢浆液性腺癌CD4+CD25+调节性T细胞为(23.58±7.08)％，明显高于混合性(18.30±5.46)％，有统计学意义(P<0.05)；与黏液性腺癌(22.06±6.08)％无差异；Ⅳ期卵巢癌患者CD4+CD25+调节性T细胞比值(28.79±4.26)％、CD44比值(157.24±33.57)％明显高于Ⅲ期(20.01±6.27)％、(124.31±29.46)％和Ⅰ-Ⅱ期患者(17.97±4.50)％、(116.08±30.93)％，(均P<0.001)；Ⅲ期与Ⅰ-Ⅱ期之间无差异；CD4+CD25+调节性T细胞、CD44与肿瘤的浸润(23.61±6.52)％、(143.38+35.11)％；淋巴结转移(24.05±6.74)％、(146.32±35.87)％；腹水的形成(24.06±6.73)％、(146.52±35.86)％有关，(P<0.05～P<0.001)；低分化的卵巢癌患者CD4+CD25+调节性T细胞(25.05±5.96)％、CD44(152.50±32.49)％与高分化患者(16.03±0.80)％、(105.95±15.43)％比较，有统计学意义，(P<0.05)，而与中分化(21.82±6.53)％、(126.26±36.00)％比较无差异。 (三)：卵巢癌患者Th1类细胞因子IL-2、TNF-a、IFN-r的水平(0.87±0.25)pg/ml、(1.09±0.34)pg/ml、(7.56±2.25)pg/ml明显低于健康对照(2.38±1.09)pg/ml、(3.28±1.36)pg/ml、(19.04±4.59)pg/ml，(均P>0.001)。而Th2类细胞因子IL-6的水平(86.28±55.92)pg/ml与对照组(5.04±2.69)pg/ml比较显著升高，(P<0.001)，IL-4(4.86±2.94)pg/ml、IL-10(1.07±2.30)pg/ml与健康人(5.62±3.59)pg/ml、(4.46±2.31)pg/ml之间无差异。通过nonparametric相关分析，卵巢癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞与IL-2、TNF-a、IFN-r存在负相关，相关系数分别为r=-0.658，P<0.05：r=-0.591，P<0.05;r=-0.695，P<0.05。与Th2类细胞因子IL-6存在正相关，相关系数r=0.784，P<0.001。 (四)：卵巢癌患者CD4+CD25+调节性T细胞与CD44、CA125之间存在着正相关，分别r=0.406，P<0.05； r=0.563，P<0.001；而与CA199之间没有相关性，r=0.036，P>0.05。 结论：(一)：卵巢癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞、Th2类细胞因子增高、Th1类细胞因子降低，这可能是卵巢癌患者免疫功能下降的一个重要原因。 (二)：CD4+CD25+调节性T细胞、CD44比例与肿瘤的分期、组织学类型、分化程度、浸润、淋巴结转移、腹水的形成有关。 (三)：卵巢癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞与Th1类细胞因子之间存在着负相关，而与Th2类细胞因子之间存在正相关。CD4+CD25+调节性T细胞可能通过Th1、Th2类细胞因子的调节发挥对效应性T细胞的抑制作用。 (四)：同步检测卵巢癌患者血清CA125及细胞黏附因子CD44以及与卵巢癌和细胞免疫功能有关的细胞因子水平，这不仅从肿瘤细胞产生癌蛋白水平上可以判断肿瘤的恶性程度及发展特征，还可以从机体的免疫状态上了解肿瘤的发展状况。对疾病的控制，治疗方案的制定有重要的意义。

目录

前言

材料和方法

1.1病人及标本的收集

1.2主要试剂

1.3主要仪器

1.4实验操作流程

1.5统计学方法

实验结果

2.1第一部分

2.2第二部分

讨论

总结

参考文献

综述 卵巢癌、女性雌激素相关肿瘤发病风险与雌激素受体基因多态性的关系

个人简介

致谢