血管细胞黏附分子-1在过敏性休克大鼠器官中的作用及其表达规律

摘要

目的：通过检测大鼠各器官组织内血管细胞黏附分子-1（vascular cell adhesionmolecule-1，VCAM-1）的含量，探讨VCAM-1在过敏性休克大鼠器官中的作用及其表达规律；对过敏性休克大鼠器官组织内的嗜酸性粒细胞进行计数，探讨其与VCAM-1表达的相关性。
　　 方法：取健康SD大鼠72只，雌雄不限，体重约150g，按如下分组（1）将12只大鼠随机分成2组：对照组（1h组）和休克组（休克死亡组），每组6只。将Compound48/80稀释成浓度为100mg/200mL的注射液，休克组每只大鼠腹腔注射4mL Compound48/80稀释液，制造过敏性休克大鼠模型。观察1h内的死亡率，1h 未死亡的，在1h时脱颈椎处死。对照组每只大鼠注射等量的生理盐水，在注射后1h 脱颈椎处死。迅速提取肺、心、脑、肾、肝、脾、胃、肠组织。（2）将36只大鼠随机分成6组：10min对照组、30min对照组、1h对照组、休克10min组、休克30min组和休克死亡组（休克组），每组6只。同上述方法制造过敏性休克动物模型。休克死亡组的在死亡后迅速提取肺组织，其它各组分别在相应时间点将动物脱颈椎处死后再提取肺组织。（3）将24只大鼠随机分成4组：对照组、休克组（休克死亡组）、休克后生理盐水组和休克后抗VCAM-1组，每组6只。生理盐水和抗VCAM-1均在休克后30min时注射。在1h 未死亡的，在1h时脱颈椎处死，迅速提取肺组织。
　　 所提取的器官组织于4％的多聚甲醛中固定，24～48h后制作石蜡切片，以备HE 染色和免疫组化染色，观察和检测（1）过敏性休克大鼠肺、心、脑、肾、肝、脾、胃、肠中嗜酸性粒细胞和VCAM-1的表达；（2）过敏性休克不同时间（休克10min、30min和死亡时）大鼠肺内嗜酸性粒细胞和VCAM-1的表达；（3）在诱导大鼠过敏性休克后用抗VCAM-1干预时大鼠肺内嗜酸性粒细胞和VCAM-1的表达。用BI-2000图像分析软件对图像进行分析，用SPSS16.0统计学软件对所得数据进行分析。
　　 结果：（1）在过敏性休克大鼠死亡时，肺内VCAM-1的表达与对照组相比显著增多，心、脑器官次之，其余器官没有明显差异。（2）大鼠过敏性休克不同时期，如休克10min、30min、休克死亡时，其肺内的VCAM-1表达与对照组相比明显增加；而且随着休克时间延长，VCAM-1表达有增多趋势。（3）与对照组相比，休克组、休克后生理盐水组及休克后抗VCAM-1组肺内的VCAM-1表达明显增加（P＜0.05），而与休克组相比，休克后抗VCAM-1组肺内的VCAM-1表达相对减少（P＜0.05）。（4）在过敏性休克中，嗜酸性粒细胞的数量与VCAM-1的表达呈正相关。
　　 结论：（1）VCAM-1在过敏性休克大鼠各器官中的表达呈现显著差异性，肺内表达增多最为明显。（2）肺内VCAM-1的表达随着过敏性休克的进展有上升趋势。（3）过敏性休克发生后，抗VCAM-1能抑制肺内VCAM-1的表达。（4）在过敏性休克中，嗜酸性粒细胞的数量与VCAM-1的表达呈正相关。

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