巨噬细胞移动抑制因子通过PI3K/Akt信号通路抑制人宫颈癌细胞凋亡的初步研究

摘要

目的：研究MIF对宫颈癌细胞凋亡的作用，及其可能通过PI3K信号通路调节相关因子的表达，从而了解宫颈癌的发生发展的机制，为宫颈癌的诊治提供理论依据，为宫颈癌的治疗提供有效的途径。
　　 方法：首先，采用免疫细胞化学和Western Blotting 检测宫颈癌细胞株中MIF、PI3K、pAkt及凋亡相关基因p53和Bcl-2蛋白的表达情况；其次，采用MTT、流式细胞术检测rhMIF刺激后人宫颈癌株的增殖和凋亡情况，并寻找rhMIF的最适刺激浓度及最佳时间，然后使用免疫细胞化学和Western Blotting 检测宫颈癌细胞株中PI3K、pAkt、p53和Bcl-2蛋白的表达情况；最后用MTT、流式细胞术检测rhMIF与PI3K 抑制剂LY294002次序作用后细胞的凋亡率。
　　 结果：宫颈癌细胞株中均有MIF的表达，且在肠转移的CaSki细胞中表达更高，表明MIF的表达可能与细胞的恶性潜能有关；rhMIF 刺激后能显著促进宫颈癌细胞的增殖，抑制其凋亡，作用呈时间-剂量依赖性；两种细胞中PI3K、pAkt、p53和Bcl-2蛋白表达均较未刺激前明显增高，刺激后的Siha细胞中因子的表达高于未受刺激的肠转移细胞CaSki。PI3K 抑制剂LY294002能显著抑制细胞的增殖，作用呈时间-剂量依赖性。LY294002能显著抑制宫颈癌细胞中PI3K、pAkt、p53、Bcl-2的蛋白表达。经外源性MIF和PI3K 抑制剂LY294002 共同干预后，宫颈癌细胞的增殖明显受抑，凋亡率升高，表明PI3K 抑制剂LY294002能显著抑制MIF 调节细胞的增殖和凋亡的能力提示MIF 可能是通过PI3K/Akt信号通路来发挥诱导细胞凋亡的作用。
　　 结论：宫颈癌细胞株中存在MIF的表达，且在有转移的细胞中表达更明显，表明MIF的表达可能与细胞的恶性潜能有关。宫颈癌细胞株中存在PI3K、pAkt、p53、Bcl-2 高表达，且与MIF的表达呈正相关，推测可能与宫颈癌细胞的凋亡抑制有关；外源性rhMIF 促进宫颈癌细胞增殖，抑制其凋亡，促进PI3K、pAkt、p53、Bcl-2在宫颈癌中的表达，从而促进宫颈癌细胞的增殖；使用PI3K 抑制剂后，宫颈癌细胞的凋亡率显著升高，提示MIF 可能通过PI3K/Akt信号转导通路调节抑制宫颈癌细胞的凋亡，维持细胞的存活。本实验研究MIF在宫颈癌增殖、凋亡中可能的作用机制，将有助于进一步了解宫颈癌的发生与发展，为阐明宫颈癌的发病机制提供线索。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文名称缩略表

声明

前言

第一部分 人宫颈癌细胞中MIF 及凋亡相关因子的表达

第二部分 外源性MIF 抑制人宫颈癌细胞凋亡并上调凋亡相关因子的表达

第三部分 MIF 通过PI3K/Akt 信号通路抑制宫颈癌细胞的凋亡

结论

参考文献

综述 MIF 对细胞凋亡的影响

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