AngⅡ、Ang1-7对THP-1巨噬细胞PPARγ、LXRα表达的影响及其相互作用

摘要

研究目的：在动脉粥样硬化形成的过程中，胆固醇的沉积和泡沫细胞的形成是一个关键的环节，过多的胆固醇可以促使巨噬细胞转化为泡沫细胞，ATP 结合盒转运子A1(ATP-bindingcassette transporter A1，ABCA1)是一个抗AS基因，它能促进细胞中胆固醇的流出，并抑制泡沫细胞的形成。过氧化物酶体增殖物激活受体（Peroxisome proliferators-activatedreceptors，PPARs)是一种调控脂质和糖类代谢的核受体，包括PPARα,PPARβ(σ)和PPARγ三种亚型，LXRs 也是核受体超家族的一员，在调节脂质代谢的过程中起着关键的作用。
　　 胆固醇浓度的升高会激活LXRs，进而诱导一系列参与胆固醇吸收、流出和转运的基因发生表达。大量研究表明，PPARγ、LXRa、ABCA1在胆固醇外流过程中呈转录级联效应，本实验通过研究AngII、Ang(1-7)对胆固醇外流中PPARγLXRa的影响，探讨二者在动脉粥样硬化中的作用。观察Ang(1-7)对AngII的拮抗作用是否由其特异性受体MAS 介导的，观察Ang(1-7)、ARB对AngII作用的影响。
　　 研究方法：人单核细胞用100nmol/L 佛波酯诱导48小时，使其转化为巨噬细胞。换用无血清培养液培养后，分组并加入不同的处理因素，分组情况为：（1）空白对照组；（2）AngII(3)Ang-(1-7) (4)AngII+Ang-(1-7)(5)AngII+ARB(6)AngII+Ang-(1-7)+A-779。AngII 有四个不同的浓度：100nmoL/L, 1000nmoL/L, 5000nmoL/L, 10000nmoL/L, Ang-(1-7)有三个不同浓度：100nmoL/L, 1000nmoL/L,10000nmoL/L，氯沙坦分三个不同的浓度：10umoL/L,50umoL/L,100umoL/L。培养48小时，收集各组细胞，提取RNA和蛋白，用RT-PCR的方法检测PPARr、LXRamRNA的表达，用western-blot方法检测PPARγ、LXRa蛋白的表达，对数据进行统计学分析，以P<0.05为差异有统计学意义。
　　 结果果：1、Ang(1-7)可以呈浓度依赖性促进PPARγmRNA及蛋白的表达；
　　 2、AngⅡ可以呈浓度依赖性抑制PPARγmRNA及蛋白的表达；
　　 3、AngII对PPARγ、LXRα的作用可以被其特异性受体阻滞剂氯沙坦阻断，这一阻断作用呈浓度依赖性增强；
　　 4、AngII对PPARγ、LXRα的作用可以被Ang-(l-7)拮抗，这一拮抗作用随Ang-(l-7)浓度的升高而增强；
　　 5、Ang-(l-7)对AngII的作用可以被其特异性受体阻滞剂A-779 阻断。差异均有统计学意义（P<0.05）。
　　 结论论：在THP-1巨噬细胞，Ang(1-7)可以呈浓度依赖性促进PPARγ、LXRα表达，AngⅡ可以呈浓度依赖性抑制PPARγ、LXRα表达。在影响二者表达的过程中，Ang(1-7)与AngⅡ的作用相拮抗，其拮抗AngⅡ的作用是通过其特异性受体MAS 介导的。ARB 类药物氯沙坦也可呈浓度依赖性阻断AngⅡ的作用。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：中英文对照表

声明

第一部分 AngII、Ang1-7 对THP-1 巨噬细胞PPARγ、LXRα表达的影响及其相互作用

第二部分 AngII 影响THP-1 巨噬细胞PPARγ、LXRα表达的受体途径及Ang1-7 对AngII 拮抗作用的受体途径

综述 PPARs 与胆固醇外流及相关因子

个人简介

致谢