隐匿性HBV感染者PBMC内HBVDNA检测及HBVS区基因变异分析

摘要

背景：HBsAg 阳性是HBV 感染的重要证据。然而临床上还存在大量HBsAg 阴性肝炎。有研究证实，在部份血清HBsAg 阴性的个体，应用聚合酶链反应（PCR）技术可以检测出血清和（或）肝组织中HBVDNA，称之为隐匿性HBV 感染。这种感染可发生于单个或者多个抗体阳性者，也可见于乙肝病毒血清学标志物（HBVM）均阴性的个体。隐匿性HBV 感染同样可以通过输血、器官移植、血液透析、母婴垂直等途径传播，也会导致多种后果。例如：乙肝疫苗免疫失败、暴发性肝衰竭、慢性肝损害、与HCV 重叠感染加重病情、导致肝细胞癌的发生等。
　　 目的：1、探讨不明原因肝病患者血清中与PBMC内HBVDNA的感染情况，判断两种检测方式对隐匿性HBV 感染的诊断意义；
　　 2、研究隐匿性HBV 感染者HBV S 区基因变异情况，分析隐匿性HBV感染发生的分子生物学机制。
　　 方法：选择不明原因肝病患者76例，分离患者血清及PBMC，分为血清组与PBMC组，采用巢式PCR分别检测两组HBVDNA，阳性者结合临床资料分析，血清组阳性者测序HBV S基因序列，分析变异位点。
　　 结果：（1）血清组和PBMC组HBVDNA 阳性率分别为21.05％(16/76)和9.21％（7/76），两组比较，差异有统计学意义，血清组阳性率高于PBMC组。（2）1例患者血清HBVDNA 阴性，但PBMC内HBVDNA 阳性。（3）7例PBMC内HBVDNA 阳性者，临床诊断均为肝硬化。结合临床资料发现，PBMC组阳性者肝硬化并发症出现几率高，病情重，合并症多。（4）血清内HBVDNA 阳性者随机抽取8例测序，a 决定簇内序列比对发现，nt574 出现A→T的突变，推导氨基酸无变化；nt587 出现G→A的突变，推导至氨基酸甘氨酸变异为精氨酸,即较为常见的G145R 突变。A 决定簇外基因序列比对发现，nt355，nt484 碱基均由A→C,推导氨基酸无变化，nt512碱基由C→A，推导氨基酸由脯氨酸变异为苏氨酸。
　　 结论：1、对于隐匿性HBV 感染的诊断，血清组优于PBMC组,但PBMC内HBVDNA的检测可作为血清检测的补充。
　　 2、隐匿性HBV 感染者PBMC内HBVDNA 阳性与肝硬化关系密切，对判断病情进展有一定的指导作用。
　　 3、G145R 突变是隐匿性HBV 感染发生原因之一。

目录

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英文文摘

论文说明：英文缩写词表

声明

前言

第一部分 不明原因肝病患者血清中和PBMC 内HBVDNA 检测

第二部分 隐匿性HBV 感染者血清中HBV S 基因变异分析

结论

附图

参考文献

综述 隐匿性乙肝病毒感染

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