低剂量吡柔比星协同TRAIL高效诱导人骨肉瘤细胞MG-63凋亡的实验研究

摘要

目的:
　　 肿瘤坏死因子相关凋亡配体(tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand，TRAIL)是肿瘤坏死因子家族的成员之一，它对肿瘤细胞具有选择性杀伤作用而对正常组织细胞无明显的毒副作用，在肿瘤治疗方面有着良好的临床应用前景。但一些肿瘤细胞对TRAIL 诱导的凋亡不敏感甚至耐受，因此如何提高TRAIL的抗肿瘤活性、克服TRAIL的耐药性成为目前TRAIL 研究的热点。本实验通过TRAIL与化疗药物吡柔比星(THP)联合作用，观察其是否存在协同诱导人骨肉瘤细胞MG-63 凋亡的作用，并初步探讨其中可能存在的分子机制，为TRAIL的临床应用提供理论基础。
　　 方法:
　　 将不同浓度的TRAIL与THP 单独或者联合应用于常规培养的MG-63细胞系，24小时后采用MTT 法测定细胞抑制率，于倒置相差显微镜下观察细胞的形态学改变，流式细胞术检测细胞凋亡比例，RT-PCR 检测药物作用后相关基因的表达水平。
　　 结果:
　　 1.TRAIL与THP 均能抑制MG-63细胞增殖，但MG-63细胞对TRAIL不敏感，IC50＞10μg/ml；对THP 相对敏感，IC50＜10μg/ml。
　　 2.亚毒性浓度THP与不同浓度TRAIL 联合，均呈现出高效协同作用(P<0.05)，协同因子均大于1。
　　 3.倒置相差显微镜及流式细胞术检测证实协同性杀伤作用主要通过诱导细胞凋亡实现。
　　 4.RT-PCR 显示两种药物联用后死亡受体DR4及DR5表达水平得到明显的增高。
　　 结论:
　　 亚毒性浓度THP与TRAIL 联用表现出高效诱导人骨肉瘤MG-63细胞凋亡的作用，死亡受体DR4及DR5的表达水平在药物作用后得到明显的增高，说明协同诱导肿瘤细胞凋亡的机制可能与上调DR4、DR5的mRNA表达有关。

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文摘

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材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

附图

·综述一·TRAIL在肿瘤治疗中的研究进展

·综述二·骨肉瘤基因治疗的研究进展

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