传染性单核细胞增多症患儿EB病毒载量与T细胞亚群的相关性分析

摘要

目的：本课题通过检测传染性单核细胞增多症患儿急性期外周血T淋巴细胞亚群及调节性T细胞的变化情况，探讨CD4+CD25+CD127-调节性T细胞在传染性单核细胞增多症发病中的可能机制，同时检测T淋巴细胞亚群及调节性T细胞与EBV-DNA浓度是否有相关性。
　　 方法：1.实验对象：47例初发住院确诊为传染性单核细胞增多症且EBV-DNA阳性的患儿作为观察组,32例为同期保健门诊的健康儿童作为对照组。各抽取外周静脉血两紫管，1个取1ml，1个取2ml，EDTA试剂抗凝。2．检测指标：A流式细胞术检测：a加抗体：于试管中分别加入CD4-PC5、CD25-FITC、CD127-PE单克隆抗体，CD4-FITC/CD8-FE/CD3-PC5三标记单克隆抗体各5ul，再在每个试管中加抗凝全血20ul，充分混匀，室温避光，孵育20分钟。b溶血：加入红细胞裂解液（溶血素）90ul，混匀，15分钟后以1000转/分离心5分钟，弃上清。c洗涤：在上述剩余液中加生理盐水，上机待检。每个样本获取10000个细胞，用流式细胞CELLQUGST软件检测CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+调节性T细胞、CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的表达值。BEBV-DNA载量检测：采集清晨空腹外周静脉血2ml，采用ABI-7300FQ-PCR仪进行检测，检测步骤、结果判断以及质量控制方法按其公司试剂操作说明进行。检测极限为5*102copies/ul，大于或等于该值为阳性。
　　 结果：与正常对照组相比，急性期IM患儿，CD3+、CD8+明显高于对照组（P均＜0.05），CD4+、CD4+/CD8+比值、CD4+CD25+、CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的表达值明显下降，差异有统计学意义（P均＜0.05）。相关性结果示：在急性期EB病毒载量与CD3+、CD8+T细胞均呈正相关，与CD4+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+、CD4+CD25+CD127-调节性T细胞呈负相关。
　　 结论：传染性单核细胞增多症患儿急性期存在细胞免疫及免疫调节功能的紊乱，其免疫功能紊乱的程度与EB病毒感染量有关，为临床IM患儿的治疗提供理论依据。调节性T细胞在IM患儿急性期减少，说明调节性T细胞可能参与了IM的发病和病情的发展。

目录

声明

英文缩略词表

前言

材料与方法

第一部分 研究对象与试剂

第二部分 实验方法

第三部分 统计学处理

结果

1.观察组与对照组T细胞亚群水平比较

2.IM组急性期EBV-DNA浓度与T细胞亚群之间的相关性分析

讨论

结论

附图

1.细胞流式图

(1) 传染性单核细胞增多症患儿

(2) 正常儿童

2.T细胞亚群与EBV浓度相关性散点图

参考文献

附录

综述

个人简历

致谢