1,25二羟维生素D3对哮喘大鼠气道重塑及纤溶酶原激活物抑制剂-1的影响

摘要

目的：
　　 观察1,25二羟维生素D3(1,25(OH)2D3,VD)对哮喘大鼠气道重塑及其肺组织中纤溶酶原激活物抑制剂-1（Plasminogen activator inhibitor-1，PAI-1）表达和血浆中PAI-1含量的影响。
　　 方法：
　　 健康雄性Wistar大鼠18只，随机分为3组（每组6只）：即对照组、哮喘组及VD干预组。第1天和第8天，哮喘组和VD干预组动物分别腹腔注射10％卵清白蛋白(ovalbumin，OVA)生理盐水溶液1mL致敏；对照组动物用生理盐水代替。第15天，将哮喘组和VD干预组动物置于自制的密闭有机玻璃箱中，用超声雾化器将1％OVA生理盐水溶液雾化吸入激发哮喘，每次30min，每天1次，共8周；VD干预组动物吸入1％OVA生理盐水溶液30min前腹腔注射1,25(OH)2D3;对照组用生理盐水代替OVA进行，方法相同。末次激发后24h内处理动物、取材。光镜下观察肺组织病理改变，用免疫组化检测肺组织PAI-1的表达，采用图像分析仪行图像分析，酶联免疫法测血浆PAI-1含量。
　　 结果：
　　 (1)各组激发后哮喘发作情况：哮喘组大鼠出现口唇发绀、呼吸急促、烦躁不安、活动频繁等表现；而VD干预组发作程度有所减轻；对照组大鼠行动敏捷，未见异常。
　　 (2)三组大鼠肺组织病理改变：与对照组相比，哮喘组大鼠肺组织光镜下可见气道上皮细胞破坏、黏膜下层和平滑肌增厚、杯状细胞增生、形成许多空泡、气道腔有脱落的细胞及黏液、气道及血管周围不同程度的炎性细胞浸润等改变。图像分析结果表明，哮喘组大鼠气道WAt/Pi较对照组大鼠增加，差异有统计学意义(P＜0.01);VD干预组WAt/Pi较哮喘组轻，差异有统计学意义(P＜0.01)。
　　 (3)免疫组化测定肺组织中PAI-1的分布与表达：对照组可见PAI-1在细胞浆呈阴性或极小部分弱阳性表达；哮喘组PAI-1在胞浆呈棕黄色强阳性表达，少量胞核着色，分布于支气管全层，与对照组相比，差异有统计学意义（P＜0.01）；VD干预组为弱阳性表达，与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.01)。
　　 (4)血浆中PAI-1含量：哮喘组大鼠血浆中PAI-1的含量显著高于对照组和VD干预组(P＜0.01)。
　　 (5)直线相关性分析显示，哮喘组支气管管壁厚度与大鼠肺组织中PAI-1表达水平呈正相关（r=0.822，P＜0.01）；哮喘组支气管管壁厚度与大鼠血浆中PAI-1含量呈正相关(r=0.942，P＜0.01)。
　　 结论：
　　 (1)用OVA致敏、激发大鼠，可以成功复制慢性哮喘模型，该模型的主要特征为气道炎症、气道重塑。
　　 (2)在哮喘反复发作过程中，哮喘大鼠肺组织PAI-1的表达增加，血浆中PAI-1含量升高，支气管管壁厚度增加。
　　 (3)一定剂量的1,25(OH)2D3能下调大鼠肺组织和血浆中PAI-1含量，能干预气道重塑过程。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

1.实验试剂及仪器

2.实验动物分组及模型的建立

3.实验方法

4.统计学处理

结果

1.各组激发后哮喘发作情况

2.三组大鼠肺组织病理改变

3.免疫组化测定肺组织中PAI-1的分布与表达

4.血浆中PAI-1含量

5.相关性分析

讨论

结论

参考文献

附图

综述

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致谢