吡格列酮对去卵巢大鼠脂联素的影响及其与骨代谢的关系

摘要

PPARγ是过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator actived receptors，PPARs)的一个亚型，作为影响骨代谢的侯选基因目前在基础和临床的相关研究较少，其人工合成配体噻唑烷二酮类药物(TZDs)作为糖尿病的治疗药物已广泛应用于临床。2006年糖尿病血糖控制的大型临床研究ADOPT研究首次正式报道TZDs对骨代谢的负面影响，表现为在绝经后女性糖尿病患者中引起骨量下降，具有引起或加重骨质疏松风险的可能，其具体机制仍待于研究。脂联素(Adiponectin，APN)是近年发现的由脂肪细胞分泌的一种特异性蛋白，具有抗炎、改善胰岛素抵抗状态、降糖、抗动脉粥样硬化及调节骨代谢的作用。目前对于脂联素在改善胰岛素抵抗等方面的研究已非常成熟，但在骨代谢里的影响机制的研究比较少，其在绝经后骨质疏松中所起的作用以及与PPAR-γ之间关系的研究在国外日渐增多，而国内尚未见报道。
　　 目的：本研究首先通过观察TZDs类药物吡格列酮对去卵巢大鼠骨代谢变化、体脂变化及骨代谢相关指标的影响，探讨其与绝经后骨质疏松的关系及作用的可能机及其对去卵巢脂联素的影响，探讨脂联素的作用机制及其骨效应，为临床合理用药提供理论基础。
　　 方法：选用144只健康雌性3月龄Wistar大鼠作为研究对象，分为去卵巢组及假手术组，两组各包括生理盐水组、吡格列酮4mg/kg.d、吡格列酮20mg/kg.d，共六组，对其进行灌胃给药，分别在0周、4周、8周、12周不同时间点各取6只大鼠进行各项指标的检测，用DPX双能X线骨密度扫描仪检测实验动物骨量的变化，脱钙骨片进行HE染色观察骨形态学变化，用血糖仪测定血糖，用放免法测定血胰岛素、血雌二醇及骨钙素的水平，用分光光度仪测定血脂、血钙、血磷，血碱磷酶变化，用RT-PCR检测PPARγ2水平，用酶联免疫法测定脂联素、骨髓上清液骨碱磷酶水平。
　　 结果：
　　 1、去卵巢组大鼠与假手术组比较，体重、TG、CHO、LDL-C、血ALP、FNS、HOMA-IR、BGP、BALP、PPARγ2、APN均升高，E2、HDL-C、BMD下降，差异有统计学意义(P<0.01)。
　　 2、不同浓度吡格列酮干预后假手术组和去卵巢组胰岛素、胰岛素抵抗指数、BMD、BGP、BALP呈剂量依赖性下降，而APN、PPARγ2呈剂量依赖性上升，组间比较差异均有统计学意义（P<0.05）。去卵巢组TG、CHO、LDL-C、ALP呈剂量依赖性下降，组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。
　　 3、吡格列酮干预后假手术组吡格列酮4mg/kg.d组以及吡格列酮20mg/kg.d组的大鼠BGP、BALP、BMD随时间的变化下降，PPARγ2、脂联素上升，组间比较差异均有统计学意义(P<0.01)。去卵巢组对照组大鼠BGP、BALP水平随时间的变化上升，吡格列酮4mg/kg.d组以及吡格列酮20mg/kg.d组的大鼠BGP、BALP水平均随时间的变化下降；对照组、吡格列酮4mg/kg.d以及20mg/kg.d组中的大鼠PPARγ2、APN水平随时间的变化上升，BMD随时间的变化下降，组间比较差异均有统计学意义(P<0.01)。
　　 4、脂联素与PPARγ2正相关(r=0.718，P<0.05)，与BGP、BALP呈正相关(r=0.339，r=0.595；P<0.05)，而与BMD呈负相关(r=-0.946，P<0.05)。
　　 5、骨形态学变化：假手术组椎骨骨小梁结构正常，与其相比，去卵巢组椎骨骨小梁变细、排列稀疏、部分断裂，骨小梁周围的成骨和破骨细胞增生活跃。吡格列酮干预后，假手术组与去卵巢组的骨小梁均有不同程度的破坏，但去卵巢组更为明显。
　　 结论：
　　 1．吡格列酮激活PPARy2转录活性上调PPARγ2表达，降低成骨细胞标志基因BGP、BALP的水平，并呈时间依赖性和剂量依赖性的降低BMD，证实了其对骨代谢的不利影响。
　　 2．吡格列酮以时间依赖性和剂量依赖性促进APN的分泌，且APN水平与BMD呈负相关，提示了APN水平的变化可能参与了TZDs类药物在绝经后患者应用引起骨量下降的发生和发展过程。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

1 材料

2 方法

结果

1.去卵巢大鼠和假手术大鼠各项指标的比较

2.不同浓度的吡格列酮干预后两组大鼠各项指标的比较

3.吡格列酮干预后不同的时间点两组大鼠各项指标的比较

4.APN与PPARγ2、BGP、BALP、BMD的相关分析

附图

讨论

结论

参考文献

综述

缩略语

个人简历

致谢