腺苷对大鼠缺血再灌注心肌Cx43的影响及与再灌注室性心律失常的关系

摘要

目的：观察腺苷预处理和后处理对大鼠心脏缺血/再灌注(ischemiareperfusionI/R)引起的室性心律失常的影响，观察腺苷对大鼠心肌Cx43表达与分布的影响，并初步探讨腺苷对Cx43的调节机制。
　　 方法：随机将32只雄性健康Wistar大鼠分为假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（I/R组）、腺苷预处理组和腺苷后处理组共4组，每组8只。采用大鼠在体缺血/再灌注模型，记录Ⅱ导联心电图。以结扎左冠状动脉前降支造成左室心肌缺血，松开结扎线即为再灌开始，所有实验大鼠均需开胸处理。Sham组(n=8)：不结扎左冠状动脉前降支，乌拉坦麻醉维持150分钟；I/R组（n=8）：缺血30分钟，再灌注2小时，余无特殊处理；腺苷预处理组(n=8)：缺血开始前给予腺苷5分钟，腺苷经股静脉由微量注射泵泵入，用法为305μg/(kg·min)，余处理同I/R组；腺苷后处理组(n=8)：再灌注开始前（即缺血25分钟时）给予腺苷5分钟，腺苷用法同腺苷预处理组，余处理同皿组。HE染色后光学显微镜下观察分析每组心肌细胞形态结构，免疫组化SABC法检测缺血再灌注区心肌Cx43的表达及分布，观察每组大鼠再灌注期前30分钟内室性心律失常的发生情况并计算心律失常评分，各组心肌细胞凋亡由Tunel法检测。
　　 结果：1、光镜下观察HE染色结果：与Sham组相比，缺血再灌注组心肌损伤程度较重；与缺血再灌注组相比，腺苷预处理组和腺苷后处理组心肌损伤减轻。2、心律失常评分与Cx43的表达：与Sham组相比，I/R组心律失常评分显著增高(P＜0.05)，心室肌Cx43表达明显减少(P＜0.05)，分布紊乱；与I/R组比较，腺苷预处理组和后处理组心律失常评分显著降低(P＜0.05)，心室肌Cx43表达增加(P＜0.05)，分布较规律。3、Tunel法测心肌细胞凋亡：与Sham组相比，缺血再灌注组心肌细胞凋亡率增高(P＜0.05)；与缺血再灌注组相比，腺苷预处理组和腺苷后处理组心肌细胞凋亡率降低(P＜0.05)；腺苷预处理组和腺苷后处理组相比，心肌细胞凋亡率差别无统计学意义(P＞0.05)。
　　 结论：腺苷可能通过抑制大鼠缺血再灌注心肌Cx43表达减少和改善其分布来发挥抗再灌注心律失常作用。