盆底骨骼肌细胞机械刺激后肌纤维类型的改变

摘要

目的：探讨盆底骨骼肌细胞在受到机械力刺激情况下Ⅰ型及Ⅱ型肌纤维含量的改变及肌球蛋白重链亚型（MHCⅠ、MHCⅡa、MHCⅡb）的改变。
　　方法：选取2012年3月在山西医科大学附属肿瘤医院行直肠癌根治术患者的肛提肌组织,显微镜下大体组织标本鉴定为肛提肌组织,且无肿瘤浸润。经显微镜鉴定大体组织标本为:镜下可见骨骼肌的横纹，可见少量结缔组织。采用两步消化法及差速贴壁法进行原代细胞培养;采用Flexcell-4000细胞柔性基底拉伸系统对细胞进行正弦波的拉伸应变加载实验(频率为3Hz，加力强度分别为3％、6%)，以未加载力的静态细胞作为对照组。用ATP酶染色法鉴定并比较（采用面密度及数密度比较）Ⅰ型和Ⅱ型肌纤维在对照组和不同受力强度3%、6%，不同受力时间6小时、24小时下含量的改变；用SDS-PAGE凝胶电泳观察肌球蛋白重链亚型（MHCⅠ、MHCⅡa、MHCⅡb）在不同受力条件下的改变。
　　结果：（1）加力强度为3%、加力时间为6小时使Ⅰ型肌纤维的面密度增加(P<0.01),Ⅱ型肌纤维的面密度减少(P<0.05)。(2)加力强度为3%、加力时间为24小时及加力强度为6%、加力时间为6小时使Ⅰ型肌纤维的面密度减少,Ⅱ型肌纤维的面密度增加(P<0.05)。(3)加力强度为3%、加力时间为6小时使肌纤维MHCⅠ%升高,MHCⅡb%降低(P<0.01)；加力强度为3%，加力时间为24小时；加力强度为6%，加力时间为6小时使肌纤维MHCⅠ%和MHCⅡb%降低,MHCⅡa%升高(P<0.01)。
　　结论：不同受力情况会引起肌纤维类型及MHC亚型之间发生变化,3%6h机械力刺激引起Ⅰ型肌纤维增加、Ⅱ型肌纤维减少及MHCⅡb向MHCⅡa、MHCⅠ方向变化；3%24h、6%6h和6%24h机械力刺激引起MHCI、MHCⅡb向MHCⅡa变化。

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前 言

第一章 材料与方法

1.材料

2.方法

第二章 结果

1.细胞的培养及鉴定结果

2 ATP 酶染色结果

3.SDS-PAGE 凝胶电泳结果

第三章 讨论

1. 刺激性刺激致肌纤维损伤的研究

2. 机械力对盆底骨骼肌细胞的影响

3. 肌纤维对环境的适应性

第四章 结论

参考文献

综 述

附录

攻读学位期间发表论文情况

致谢

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