CTGF、HGF及Cx43在PCOS大鼠卵巢中的表达及二甲双胍的干预作用

摘要

目的：
　　以来曲唑诱导的多囊卵巢综合征[1]（Polycysticovarysyndrome,PCOS）大鼠模型为研究对象，探讨结缔组织生长因子(CTGF)、肝细胞生长因子（HGF）、间隙连接蛋白43（Cx43）在多囊卵巢综合症（PCOS）大鼠卵巢中的表达，并探讨应用胰岛素增敏剂-二甲双胍后，PCOS大鼠卵巢这三种因子的变化，探讨其用于干预PCOS的作用机理。
　　方法：
　　选取大鼠55只（6周龄清洁级雌性Wistar），依据体重及窝别随机分为对照组15只、模型组40只。应用来曲唑造模，大鼠适应性喂养3天后，每日行阴道涂片(巴氏染色)监测大鼠的动情周期的变化。喂养21天后，从模型组40只中随机选取10只用于造模效果评价，当成功率大于80％时，将模型组剩余的30只大鼠，随机分为二甲双胍干预组15只和PCOS组15只，分别喂服二甲双胍300mg/(kg·d)和等量生理盐水。14天后各组大鼠进行口服葡萄糖耐量实验（OGTT），血糖仪测定空腹血糖（FPG）、服糖后1h血糖（1hPG）、服糖后2h血糖（2hPG），采用放射免疫法测定各组大鼠血清黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)、雌二醇(E2)值及空腹胰岛素（FIN）值。然后将大鼠称重并解剖，打开腹腔摘取卵巢，进行固定、包埋，并组织切片后将标本HE染色光镜下观察卵巢组织的病理结构变化，最后采用免疫组化法测定卵巢组织中CTGF、HGF、CX43的表达水平，并采用图像分析仪获取三种因子表达的灰度值进行统计学分析。
　　结果：
　　1．动情周期的变化：应用来曲唑12天后大鼠动情周期发生变化，表明无排卵[2]；而对照组动情周期依然存在规律性。
　　2．卵巢解剖学变化：与对照组相比，PCOS组大鼠卵巢重量升高(P<0.05)。对照组卵巢颜色较红，体积较小；模型组大鼠卵巢颜色苍白，体积较大，包膜下隐约可见扩张的卵泡。与PCOS组相比，干预组卵巢重量显著降低(P<0.05)，卵巢体积较PCOS组明显缩小。
　　3．卵巢组织学变化：对照组镜下可见多个不同发育程度的卵泡，颗粒细胞呈6-8层，形态完整，卵泡膜细胞排列整齐。PCOS组镜下可见卵泡呈扩张状态，卵泡内卵母细胞或放射冠消失，颗粒细胞层数减少，且排列松散，卵泡膜细胞层相对明显增厚，干预组镜下见颗粒细胞层数有所增加，卵泡膜细胞层明显变薄。
　　4．OGTT及FIN水平：PCOS组血清FIN水平、FPG、1hPG、2hPG显著高于对照组(P<0.05)；干预组血清FIN水平、FPG、2hPG显著低于PCOS组(P<0.05).
　　5．血清性激素水平：PCOS组血清LH、T浓度显著高于对照组(P<0.05)，血清FSH、E2浓度显著低于对照组(P<0.05)；干预组血清LH、T浓度显著低于PCOS组(P<0.05)，血清FSH、E2浓度显著高于PCOS组(P<0.05)。
　　6.卵巢局部调节因子的表达：PCOS组卵巢颗粒细胞及卵泡膜细胞CTGF、HGF表达较对照组升高，Cx43的表达降低(P<0.05)，而在干预组CTGF、HGF的表达比PCOS组均明显下降(P<0.05)，与对照组相比仍较高(P＞0.05)，Cx43的表达升高(P<0.05)，与对照组相比仍较低(P＞0.05)。
　　结论：
　　1．CTGF、HGF及Cx43在卵巢组织中的表达与PCOS的发病密切相关。
　　2．二甲双胍可通过调节CTGF、HGF及Cx43的表达而对PCOS起到干预作用。

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封面

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中文摘要

英文摘要

英文缩略词表

前 言

材料与方法

1 主要实验试剂

2 主要实验仪器

3大鼠PCOS模型的建立

4口服葡糖耐量试验（OGTT）

5 血清的留取与标本的采集

6 实验方法

7统计学方法

结 果

1 动情周期监测结果

2 卵巢形态学观察结果

3 血清性激素水平测定结果

4.OGTT及空腹胰岛素（FIN）水平测定结果

5卵巢组织CTGF的表达结果

6卵巢组织HGF的表达结果

7卵巢组织Cx43的表达结果

讨 论

1来曲唑诱导大鼠PCOS模型的评价

2卵巢中的CTGF的过度表达与PCOS的关系

3卵巢中的HGF的过度表达与PCOS的关系

4卵巢中的CX43的过度表达与PCOS的关系

5二甲双胍用于PCOS干预机理的探讨

结 论

参考文献

综述

个人简历

致谢