C-met蛋白表达及KRAS,PIK3CA基因突变在结直肠癌原发灶和肝转移灶中的临床意义

摘要

目的：
　　检测结直肠癌(colorectal cancer，CRC)原发灶和相应肝转移灶癌组织中C-met蛋白表达情况及KRAS，PIK3CA基因突变状态，并分析其与CRC各个临床病理参数及预后的相关性。
　　方法：
　　1.对58例CRC原发灶及相应肝转移灶癌组织分别采用免疫组织化学法（IHC）检测C-met蛋白表达情况，分析其表达差异。
　　2.采用实时荧光定量PCR方法（Real-time PCR）检测58例CRC患者原发灶和肝转移灶癌组织中KRAS，PIK3CA基因突变状态。
　　结果：
　　1.58例CRC原发灶和相应肝转移灶中C-met蛋白高表达率分别为74.14％(43/58），81.03%（47/58）。原发灶中C-met蛋白高表达与临床分期相关，转移灶中C-met蛋白高表达与原发灶大体分型相关，差异有统计学意义。
　　2.58例CRC中，KRAS基因在原发灶和相应肝转灶中的突变率分别为31.03%（18/58）、25.86%（15/58），最常见的突变位点为G12D。PIK3CA基因在CRC原发灶和相应肝转灶中的突变率分别为8.62%（5/58）、10.34%（6/58），最常见的突变位点为E545K。仅有1例CRC同时发生KRAS、PIK3CA基因突变。
　　3.KRAS，PIK3CA基因突变状态在结直肠癌原发灶及相应肝转移灶中的一致性较好（Kappa≥0.75）。
　　4.KRAS突变状态与CRC原发肿瘤部位、转移灶数目、大体类型相关（P＜0.05），PIK3CA突变状态与同时性/异时性肝转移、转移灶数目等方面有统计学差异（P＜0.05）。
　　5.同时性肝转移和KRAS突变是影响CRC预后的危险因素。
　　结论：
　　1.原发灶中C-met蛋白高表达与临床分期相关，转移灶中C-met蛋白高表达与原发灶大体分型相关。
　　2.KRAS突变状态与CRC原发灶的肿瘤部位、转移灶多少、大体类型相关，PIK3CA突变状态与同时性/异时性肝转移、转移灶多少相关。
　　3.原发灶和/或肝转移灶均可作为分子检测的组织来源。
　　4.同时性肝转移和KRAS突变均与CRC预后不良相关。

目录

声明

常用缩写词中英文对照表

前言

1 材料与方法

1.1病例资料

1.1.1病例收集

1.1.2临床资料

1.1.3随访

1.2主要仪器设备

1.3主要试剂

1.3.1 PCR试剂盒

1.3.2 免疫组织化学抗体

1.4组织芯片制备

1.5免疫组组织化学实验

1.5.1免疫组化实验步骤

1.5.2结果判定

1.6 PCR实验

1.6.1 DNA提取过程

1.6.2DNA浓度的测定

1.6.3扩增

1.6.4判读标准

1.7统计方法

2 实验结果

2.1病理组织学特点

2.2免疫组织化学结果

2.2.1C-met蛋白在结直肠癌原发灶和肝转移灶表达情况

2.2.2C-met蛋白表达与CRC临床病理特征的关系

2.3 PCR结果

2.3.1KRAS、PIK3CA突变状态与CRC临床病理参数的关系

2.3.2原发灶和转移灶中KRAS、PIK3CA突变的相关性

2.3.3 原发灶与转移灶中KRAS、PIK3CA突变的一致性分析

2.3.4 原发灶和转移灶中C-met蛋白与KRAS、PIK3CA基因的相关性

2.4预后

3 讨 论

4 结 论

参考文献

综述:转移性结直肠癌的分子研究进展

致谢

个人简历