细胞色素酶CYP450基因多态性与IV期非小细胞癌DP方案化疗敏感性关系的研究

摘要

背景：
　　 原发性支气管肺癌（简称肺癌）是全球最常见的恶性肿瘤之一，仍是世界范围内病死率最高的恶性肿瘤。依据生物学行为的不同，可将肺癌分为小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC)两大类，后者占肺癌总发病率的80％左右。大多数NSCLC患者确诊时已为晚期肺癌（ⅢB期和Ⅳ期），而失去了手术机会。目前，化疗仍是晚期NSCLC主要的治疗手段，由于NSCLC患者对抗肿瘤药物敏感性的个体差异，可引起化疗疗效的差异性。细胞色素P450(cytochrome P450，简称CYP450)，细胞色素酶CYP450又称混合功能氧化酶或单加氧酶，是重要的Ⅰ相反应代谢酶类，也是微粒体混合功能氧化酶系中最重要的一类氧化酶。药理遗传学研究已证明，药物代谢相关酶的基因多态性，可导致不同个体的药物代谢特的差异性，进而影响个体对化疗药物的敏感性。本研究通过检测CYP450的基因多态性，观察这种遗传性的差异是否与抗肿瘤药物的疗效具有相关性，以期在临床诊疗过程中，借助基因多态性的检测来预测抗肿瘤治疗效果，为指定化疗个体化方案提供相关的参考依据。
　　 目的：
　　 探讨CYP1B1*3、CYP3A4*18B及CYP3A5*3基因多态性与Ⅳ期非小细胞肺癌DP化疗方案（即多西他赛联合顺铂化疗方案）敏感性的关系。
　　 方法：
　　 选择2011年8月至2012年6月山东省肿瘤医院经病理组织学或细胞学确诊的109例Ⅳ期初治的NSCLC患者，所有患者均采用DP方案化疗（多西他赛70mg/m2加入5％葡萄糖注射液溶液或生理盐水250ml中静脉滴注1h，d1;顺铂25mg/m2加入生理盐水500ml中静脉滴注1h，d1～3;21天为1个周期），连续化疗2个周期后，参照“实体肿瘤疗效评价标准”1.1版评价疗效。基因型的检测采用焦磷酸测序方法，检测化疗前外周血的CYP1B1*3、CYP3A4*18B及CYP3A5*3的基因型，分析各基因型与化疗疗效的关系。统计分析采用SPSS17.0软件，评价各个基因型有效率的差异采用Fisher's exact test或Pearson's chi-square test检验，全部检验均为双侧检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
　　 结果：
　　 1.109例Ⅳ期NSCLC患者中，CYP1B1*3基因C/C、C/G和G/G基因型的分布频率分别为70.6％（77例）、23.9％（26例）和5.5％（6例）;CYP3A4*18B基因T/T、C/T和C/C基因型的分布频率分别为9.2％（10例）、28.4％（31例）和63.3％（69例）;CYP3A5*3基因A/A、A/G和G/G基因型的分布频率分别为6.4％（7例）、26.6％（29例）和67.0％（73例），3个位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg遗传平衡，表明其基因型具有良好的代表性;
　　 2.109例Ⅳ期NSCLC患者采用DP方案化疗2个周期后评价疗效，CR9例(8.3％)，PR36例(33.0％)，SD59例(54.1％)，PD5例(4.6％)，客观有效率为41.3％(45/109);
　　 3、男性和女性患者DP方案化疗方案的客观有效率不同，分别为36.7％(22/60)、46.9％(23/49)，但差异无统计学意义(x2=1.174，P=0.279），年龄与化疗的客观有效率之间无统计学相关性(t=-1.474，P=0.144)，PS评分0～1和PS评分2的患者DP方案化疗的客观有效率不同，分别为41.4％(36/87)、40.9％(9/22)，但差异无统计学意义(x2=0.002，P=0.968)，腺癌、鳞癌及其他病理类型的患者DP方案化疗的客观有效率不同，为分别68.9％(31/82)、20.0％(9/21)和11.1％(5/6)，但差异也无统计学意义(x2=4.807，P=0.090);
　　 4.携带CYP1B1*3基因C/C、C/G和G/G基因型的客观有效率不同，分别49.4％(38/77)、23.1％(6/26)和16.7％(1/6)，且差异有统计学意义(P=0.028，95％CI:0.022～0.028)，携带CYP1B1*3 C/C基因型的患者化疗有效率高;
　　 5.携带CY3A4*18B基因T/T、T/C和C/C基因型患者的客观有效率不同，分别为12.5％(1/8)、48.4％(15/31)和42.0％(29/69)，差异无统计学意义(P=0.133，95％CI:0.135～0.149)，携带CY3A5*3基因A/A、A/G和G/G基因型患者的客观有效率不同，分别为16.7％(1/6)、44.8％(13/16)和42.5％(31/73)，差异无统计学意义(P=0.317，95％CI:0.345～0.363)。
　　 结论：
　　 1、采用DP方案化疗的初治Ⅳ期NSCLC患者中，性别、年龄、PS评分和病理类型与化疗疗效无关;
　　 2、携带CYP1B1基因C/C、C/G和G/G基因型患者与DP方案化疗的疗效有关，携带CYP1B1*3 C/C基因型的患者有效率比携带C/G和G/G基因型高;
　　 3、携带CY3A4*18B基因T/T、T/C和C/C基因型患者与DP方案化疗的疗效无关，其客观有效率无统计学差异;携带CY3A5*3基因A/A、A/G和G/G基因型患者与DP方案化疗的疗效无关，其客观有效率也无统计学差异;
　　 4、本研究的样本量较小，只能在一定程度上揭示GYP450基因多态性与化疗疗效的相关性，我们还将继续本项研究，扩大样本量并观察患者的中位进展时间及长期生存率，以期得到更确切的结论。

目录

声明

摘要

主要符号表

第1章 前言

第2章 材料与方法

1．病例选择及资料收集

1．1 纳入标准

1．2 排除标准

1．3 化疗前的评估

2 治疗方法及疗效评价

2．1 治疗方法

2．2 疗效评价标准

3 实验材料与方法

3．1 实验试剂

3．2 主要仪器设备

3．3 实验方法

4 统计学方法

第3章 研究结果

1 临床基本特征及疗效评价情况

2 基因型检测结果

2．1 PCR扩增片断的电泳结果

2．2 焦磷酸测序结果

3 统计学分析

3．1 临床病理因素与DP方案化疗疗效的关系

3．2 基因型的分布及其H-W遗传平衡检验

3．3 基因多态性与化疗疗效的关系

第4章 讨论

1 多西紫杉醇抗肿瘤机制的介绍

2 细胞色素酶CYP450概述

3 CYP1B1基因多态性与化疗疗效的关系

4 CYP3A基因多态性与化疗疗效的关系

第五章 结论

参考文献

附录

综述 CYP1B1基因多态性与癌症关系的研究进展

攻读学位期间发表的文章

致谢