复方灵芝健肾汤对糖尿病肾病大鼠肾脏AGT和IGF-1表达的影响

摘要

目的：本实验以链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）诱导的糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）大鼠为研究对象，在验证复方灵芝健肾汤对DN大鼠肾脏保护作用的基础上，以肾脏血管紧张素原（angiotensinogen，AGT）和胰岛素样生长因子-1(inuslin-like growth factor-l，IGF-1)表达失衡为切入点，探讨该方剂对DN防治的作用机制，为临床应用提供理论依据。
　　方法：选择30只健康雄性SD大鼠，适应性饲养1周后，随机取20只单次无菌腹腔注射STZ建立DN大鼠模型，并均分为模型组、给药组，余为空白组。给药组给予复方灵芝健肾汤20ml/(kg?d)灌胃，模型组和空白组给予等量生理盐水。12周后观察记录大鼠一般情况，代谢笼收集24h尿液，统计尿量并检测24h尿蛋白，应用ELISA法测尿AGT及IGF-1。股动脉采血测定血肌酐、尿素氮、血糖及糖化血红蛋白水平。处死动物，留取肾脏组织，称质量，计算肾/体重指数，部分肾脏以10％中性甲醛固定肾组织做石蜡切片，并免疫组化光镜下观察肾组织中AGT、IGF-1表达情况。
　　结果：（1）与空白组比较，模型组和给药组大鼠体质量明显下降（p<0.01），肾/体重指数、生化指标均显著升高（p<0.01）。镜下可见大鼠肾小球肥大、系膜基质增生、基底膜增厚，肾小管可见蛋白管型及上皮细胞变性，肾脏中AGT和IGF-1表达显著升高（p<0.01）；尿中AGT和IGF-1水平显著升高（p<0.01）；（2）与模型组相比，给药组体质量增加（p<0.01），24h尿蛋白显著降低（p<0.01），血肌酐、尿素氮及肾/体重指数明显降低（p<0.05），差异均有统计学意义；病理改变较模型组明显减轻，尿中AGT和IGF-1水平降低明显（p<0.01）；肾脏组织中AGT和IGF-1表达水平降低明显（p<0.01），差异有统计学意义。
　　结论：复方灵芝健肾汤对早期DN大鼠肾脏有保护作用，其机制可能是降低肾脏组织中AGT和IGF-1表达及尿AGT和IGF-1水平，进而抑制肾脏RAS系统活性，减少了尿蛋白，延缓了DN进程，保护了肾功能。

目录

声明

主要符号表

第一章 引言（前言）

第二章 材料与方法

2.1 实验材料

2.2 实验方法

2.3 统计学方法

第三章 结 果

3.1 一般情况

3.2 复方灵芝健肾汤对DN大鼠血糖及糖化血红蛋白的影响

3.3 复方灵芝健肾汤对DN大鼠肾指标及24h尿蛋白的影响

3.4 复方灵芝健肾汤对DN大鼠尿AGT及IGF-1的影响

3.5 复方灵芝健肾汤对 DN 大鼠肾组织病理形态的影响

3.6 肾组织AGT及IGF-1免疫组化染色结果

第四章 讨 论

4.1 动物模型评价

4.2 复方灵芝健肾汤组方分析

4.3 复方灵芝健肾汤对DN大鼠的治疗作用

4.4 复方灵芝健肾汤对糖尿病肾病大鼠肾脏及尿AGT影响

4.5 复方灵芝健肾汤对糖尿病肾病大鼠肾脏及尿IGF-1影响

第五章 结 论

参考文献

附录

综述:中药治疗糖尿病肾病分子机制研究进展

攻读硕士学位期间完成的学术论文

致谢