低渗诱导虾夷扇贝三倍体的研究

摘要

本文以虾夷扇贝(Patinopectenyessoensis)为研究对象，尝试开发了一种多倍体诱导的新方法——低渗诱导，通过低渗处理抑制虾夷扇贝受精卵第二极体(PB2)的释放产生三倍体。研究中探索了低渗处理的最佳诱导条件，进行了多倍体的诱导和培育以及幼虫和幼贝的生长、存活、倍性变化等观察研究，并通过电镜观察了受精卵经低渗处理后超微结构的变化，以期为多倍体育种理论提供新的实验和实践依据，为贝类多倍体育种开辟一条新的途径。 研究主要分为以下三个部分： 1、低渗诱导虾夷扇贝三倍体最佳诱导参数的探讨 采用低渗方法，通过不同诱导参数包括：低渗盐度(S=8、10、12、14、16、18)、处理时机(第二极体出现率达30％、50％和出现第一个第二极体时)和处理持续时间(10min、15min、20min、25min)分别抑制受精卵第二极体的释放诱导虾夷扇贝三倍体，以获得最佳诱导条件。结果表明：以低渗盐度S=12，在第一个PB2出现时开始处理，持续处理20min，能够最有效地诱导虾夷扇贝三倍体，平均诱导率为(81.12±3.82)％，最高可达84.74％。 2、虾夷扇贝三倍体的培育 采用低渗方法，以最佳诱导条件诱导虾夷扇贝三倍体，进行了两次小规模生产性实验研究：在海阳，对诱导的虾夷扇贝三倍体进行幼虫培育，处理组的卵裂率、孵化率分别为39.03％、42.91％，对照组分别为48.63％、58.25％。；三倍体处理组的幼虫比二倍体对照组的幼虫生长速度具有一定的优势，尤其在进入壳顶幼虫时期，两组生长差异明显(P<0.001)，进入匍匐幼虫以后，差异开始减小(P<0.05)；三倍体处理组的相对存活率不断下降，存活率低于同期对照组；三倍体处理组的三倍体率由刚孵化出D形幼虫时为73.86％，培育13天后下降到56.47％。在獐子岛，对诱导的虾夷扇贝三倍体培育至幼贝，在幼虫期、稚贝期、5月龄、8月龄和12月龄处理组三倍体率分别为55.81％、35.00％、13.33％、8％、8％，5月龄和8月龄时发现有2n/3n嵌和体的存在，嵌合体率分别为3.33％和2.00％；三倍体在幼贝阶段未表现明显的生长优势。 3、低渗处理虾夷扇贝受精卵的电镜观察 采用透射电镜对低渗处理的虾夷扇贝受精卵进行超微结构的观察，对比处理前后受精卵结构的变化，结果表明，低渗处理能够引起受精卵发生很大变化：卵膜破坏，质膜发生皱缩和部分溶解，细胞基质变稀疏，卵黄颗粒皱缩变形，线粒体空泡化、膨胀甚至部分单位膜破坏，高尔基复合体囊泡化，粗面内质网核糖体脱落；当处理结束放入正常海水浸泡后，受精卵有一定程度的恢复：质膜变得平整，细胞基质比较充盈，卵黄颗粒形状比较规则，线粒体大部分结构恢复正常，高尔基复合体囊泡化减轻。低渗处理对线粒体等细胞器的破坏，影响了受精卵的正常能量代谢和发育，导致虾夷扇贝三倍体卵裂率、孵化率低于对照组。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

第一章文献综述

1.1三倍体育种研究的贝类种类

1.2三倍体贝类的育种方法

1.3三倍体诱导的影响因素

1.4三倍体贝类的生物学特性

1.5三倍体育种中非整倍体的现象

1.6三倍体育种的前景及展望

第二章低渗诱导虾夷扇贝（Patinopecten yessoensis）三倍体最佳诱导参数的探讨

2.1材料与方法

2.2结果

2.3讨论

第三章虾夷扇贝（Patinopecten yessoensis）三倍体的培育

第一节虾夷扇贝三倍体幼虫的培育

3.1.1材料与方法

3.1.2结果

3.1.3讨论

第二节虾夷扇贝三倍体幼贝的培育

3.2.1材料方法

3.2.2结果

3.2.3讨论

第四章低渗处理虾夷扇贝（Patinopecten yessoensis）受精卵的电镜观察

4.1材料与方法

4.2结果

4.3讨论

参考文献

致谢