海洋硫酸多糖916对大鼠CYP450不同亚型代谢酶的影响及性别差异的研究

摘要

海洋硫酸多糖916是以海洋甲壳质为基础原料，经过多步分子修饰而成的一种聚阴离子硫酸氨基多糖。经系统的药效学研究表明916具有良好的抗动脉粥样硬化活性。 肝药酶包括I相酶(细胞色素P450)和II相酶。肝脏I相酶的功能状态对药物的疗效和毒性有重大影响。人类肝脏中与药物代谢密切相关的细胞色素P450(CYP450)亚型主要有CYPIA2，CYP3A和CYP2E1等。阐明该药物对CYP450的诱导或抑制作用以及这种作用是否有性别差异，对于药物的药代动力学研究、药物的安全性评价、预防临床用药中的药物间相互作用以及临床给药方案的设计都有非常重要的意义。目前欧美各国已经把CYP450s及其同功酶测定用于新药的筛选及代谢研究，并把它列为新药申报必须进行的一项试验。 本论文使用3种探针药物咖啡因、氨苯砜、氯唑沙宗，分大鼠整体试验、大鼠离体试验两个途径，通过药物代谢的药动学参数评价916对CYP450亚型CYP1A2、CYP3A、CYP2E1的诱导或抑制作用以及这种作用是否存在性别差异，从而全方位地对这种新药进行安全性评价并为其临床合理用药提供参考。 咖啡因、氨苯砜和氯唑沙宗三种探针药物通过回收率、精密度、灵敏度等HPLC方法学考察，结果表明，可作为“Cocktail”探针药物来评价916对CYP450亚型的影响。 整体试验部分通过空白对照组和916诱导组三种探针药物咖啡因、氨苯砜、氯唑沙宗的药时曲线和药代动力学参数考察海洋硫酸多糖916在雌雄大鼠体内对CYP450不同亚型CYP1A2、CYP2E1、CYP3A代谢酶的影响。离体试验部分采用肝微粒体体外孵育法，通过对大鼠肝微粒体对照组和916诱导组分别进行体外孵育，得出三种探针药物肝微粒体浓度对数-时间曲线，计算体外消除速率，进行比较，考察海洋硫酸多糖916在雌雄大鼠体外对CYP450不同亚型CYP1A2、CYP2E1、CYP3A代谢酶的影响。体内外试验结果均证明海洋硫酸多糖916对同一性别大鼠肝微粒体CYP450不同亚型1A2、2E1、3A无显著的诱导或抑制作用。为916的体内代谢研究和毒性评价、安全性评价提供重要线索，为其临床试验和应用提供理论依据。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

第一章海洋硫酸多糖916对大鼠CYP450的影响及其性别差异的整体实验

1.引言

2实验材料

2.1药品与试剂

2.2实验动物

2.3实验仪器

3血浆中三种探针药物分析方法的建立

3.1标准品的配制

3.2血浆样品的预处理

3.3色谱条件

3.4系统适应性实验

3.5最低检测限

3.6标准曲线的建立

3.7日内与日间精密度

3.8提取回收率

4动物给药方案及血浆样品的采集

4.1动物给药方案

4.2血浆样品的采集

5实验结果

5.1三种探针药物的血药浓度及药时曲线

5.2药代动力学参数

6小结与讨论

6.1色谱条件的选择

6.2海洋硫酸多糖916在大鼠体内对CYP450不同亚型代谢酶的影响

第二章海洋硫酸多糖916对大鼠CYP450的影响及其性别差异的离体实验

1引言

2实验材料

2.1药品与试剂

2.2实验动物

2.3实验仪器

3实验方法

3.1实验溶液的配制

3.2肝微粒体的制备

3.3肝微粒体基本参数的测定

3.4体外孵育

3.5孵育时间的选择

3.6孵育蛋白浓度的选择

3.7肝微粒体中三种探针药物分析方法的建立

4实验结果

4.1与CYPlA2有关的结果

4.2与CYP2E1有关的结果

4.3与CYP3A有关的结果

5小结与讨论

5.1大鼠肝微粒体的体外试验结果分析

5.2性别差异的研究

第三章结论

参考文献

致谢

个人简历