蓝细菌聚球藻属(Synechococcus)LZ1藻株的分子鉴定及其培养条件初步研究

摘要

蓝细菌(Cyanobacteria)又称为蓝藻，其能产生多种具有较高应用价值的初级及次级代谢产物，但是对于蓝细菌的分类目前比较复杂，具有多种认识。在本实验中，我们将一株已经过形态学初步鉴定为假鱼腥藻属（Pseudanabaena）的蓝细菌LZ1通过基于16SrRNA的分子鉴定技术与形态学鉴定相结合，对蓝细菌LZ1进行了分类鉴定。蓝细菌LZ1的16SrRNA序列较为保守，变异性不高，可用于属水平上的分类鉴定，测序所得的16SrRNA片段经过拼接后最终用于进行序列分析的长度为413bp，AT含量为47.5％，经过系统发育分析，发现蓝细菌LZ1与聚球藻属（Synechococcus）在四种方法（MP法，ML法、NJ法及贝叶斯法）基于16SrRNA基因序列构建的系统发育树均以较高的支持率或后验概率值聚在一个分支上，与假鱼腥藻没有聚在一个分支，LZ1与聚球藻属其他菌株的种间遗传距离在0.002~0.012之间，与聚球藻科其他属及假鱼腥藻属的遗传距离在0.105~0.156之间，前者的种间遗传距离明显小于后者，可将蓝细菌LZ1归为聚球藻属（Synechococcus sp.）。我们又对蓝细菌LZ1的培养条件进行摸索与调控，在不同浓度的NaHCO3、磷、尿素和硝酸钠和不同起始pH值培养蓝细菌LZ1，并测其每天的OD700和pH值，绘制生长曲线和pH值变化曲线。发现蓝细菌LZ1对高盐高碱适应性较强，在高碱条件下仍然可以正常生长，最适NaHCO3浓度为100mM/L，最适起始pH值为8.5，生长中对氮元素的利用偏好硝态氮（硝酸钠），浓度在681.683mg/L时生长最好，而磷元素对蓝细菌LZ1影响较小，甚至在0浓度下还可以正常生长。同时还进行了色素分析及蛋白质和氨基酸含量及组分分析,得到总粗蛋白质含量为35.8%，氨基酸总量为34.4%，其中谷氨酸含量最高，具有较大的应用潜力。

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1 绪论

1.1微藻概述及其研究进展

1.2蓝细菌概述及其研究进展

1.3研究目的及技术路线

2 形态学鉴定

2.1前言

2.2 材料及方法

2.3 讨论

3 蓝细菌LZ1 16SrRNA分子鉴定

3.1 前言

3.2材料和方法

3.3 实验结果

3.4 讨论

4 蓝细菌LZ1的生理生态研究

4.1前言

4.2 材料及方法

4.3 实验结果

4.4 讨论

5 总蛋白质测定及氨基酸组分分析

5.1前言

5.2 实验方法

5.3 实验结果及讨论

6 总结及展望

参考文献

致谢

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