钩藤总碱抗高血压血管重塑、抑制血管平滑肌细胞增殖的研究

摘要

目的：钩藤总碱抗高血压血管重塑、抑制血管平滑肌细胞增殖的作用及其机制。 方法：①在体实验观察钩藤提取物钩藤总碱对SHR尾动脉血压的影响，观察三级动脉血管光镜和体视学变化，检测SHR胸主动脉血管紧张素Ⅱ，胸主动脉平滑肌细胞内Ca2+变化，以研究钩藤总碱的降压、改善血管重塑及可能的机制②建立培养以血管紧张素Ⅱ诱导增殖的VSMC模型。检测指标及方法：MTT反映细胞DNA合成水平，平滑肌细胞生长曲线观察钩藤总碱对细胞生长的抑制作用，流式细胞仪观察VSMC周期、培养细胞内钙的浓度、c-myc基因表达。 结果：钩藤总碱可以降低SHR尾动脉血压，与模型组相比有非常明显差异(P＜0.01)，模型组大鼠胸主动脉、肾动脉和肠系膜动脉的管壁内膜、中膜和外膜均存在不同程度的增厚现象；胸主动脉、肾动脉和肠系膜动脉中膜厚度/管腔直径的比值明显升高，与正常对照组相比存在非常显著的差异(P＜0.01)。与模型组比较，钩藤总碱组大鼠胸主动脉、肾动脉和肠系膜动脉中膜厚度/管腔直径的比值均明显降低(P＜0.05)。同时钩藤总碱降低了SHR血管AngⅡ及平滑肌细胞内Ca2+含量，与模型组有显著差异及非常显著性差异(P＜0.05、P＜0.01)。离体培养VSMCAngⅡ诱导增殖组具有明显促进VSMC增殖作用；药物组在12h、24h均可抑制VSMC增殖，与模型组比较差异有显著性、非常显著性(P＜0.05、P＜0.01)。各组进行了VSMC生长曲线的描记，经含药物的培养基干预后，细胞生长曲线下移，钩藤总碱组抑制作用较卡托普利组明显。细胞周期研究发现钩藤总碱组与诱导增殖组相比，G1期增高(P＜0.05)，S期明显降低(P＜0.01)，可见钩藤总碱可以阻断细胞由G0/G1期向DNA合成的S期转化，从而抑制培养VSMC增殖的作用。与AngⅡ诱导增殖组相比，钩藤总碱组VSMCCa2+表达水平显著降低(P＜0.01)，与AngⅡ诱导增殖组相比，钩藤总碱组VSMCc-myc蛋白表达水平显著降低(P＜0.01)，说明钩藤总碱抑制VSMC增殖的作用可能与降低细胞内钙水平及调控病理状态下c-myc基因过度表达有关。 结论：钩藤总碱具有降压和改善血管重塑作用，其降压机制与降低血管局局部AngⅡ和VSMCCa2+有关；改善血管重塑可能与降压和抑制VSMC增殖有关；抑制VSMC增殖的作用与其降低细胞内钙水平及调控病理状态下c-myc基因过度表达有关。

目录

文摘

英文文摘

原创性声明及关于学位论文使用授权的声明

引 言

第一部分高血压治疗现状

第二部分在体、离体动物实验研究实验一钩藤总碱对SHR降压及血管重塑影响的在体研究

第二部分在体、离体动物实验研究实验二钩藤总碱对Wistar大鼠血管平滑肌细胞增殖影响的研究

第三部分讨论

结 语

参考文献

综 述中药调控血管平滑肌细胞增殖研究进展

附 录

致 谢