酸枣仁汤含药血清对皮质酮诱导PC12细胞凋亡模拟焦虑症神经细胞损伤状态的保护作用研究

摘要

目的：通过观察酸枣仁汤含药血清对皮质酮(CORT)诱导PC12细胞凋亡的保护作用及相关调控蛋白的表达，探讨酸枣仁汤抗焦虑作用的分子机制，为指导临床和进一步研发新的抗焦虑类中药提供依据。 方法：以高浓度皮质酮诱导PC12细胞凋亡模拟焦虑症神经细胞损伤状态，通过四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)观察酸枣仁汤含药血清对皮质酮干预的PC12细胞增殖的影响；采用流式细胞计数法配合姬姆萨(Giemsa)染色法观察酸枣仁汤含药血清对皮质酮诱导的PC12细胞凋亡的影响；通过免疫细胞化学染色法检测细胞内半胱氨酸蛋白酶蛋白-3(Caspase-3)、核转录因子-кB(NF-кB)、B细胞淋巴瘤/白血病-2因子(Bcl-2)的表达。 结果：酸枣仁汤含药血清可使皮质酮干预的PC12细胞增殖率明显升高，细胞凋亡率明显降低；Giemsa染色显示其细胞形态完整，偶见凋亡小体；免疫细胞化学染色观察发现其细胞内Caspase-3表达下降，Bcl-2表达增加，但与西药对照组相比Bcl-2表达差异不显著，实验各组免疫细胞化学染色检测NF-к B的表达均未见明显差异。 结论：酸枣仁汤含药血清能提高皮质酮损伤的PC12细胞增殖率，降低皮质酮诱导的PC12细胞凋亡率，其抗皮质酮诱导PC12细胞凋亡的可能分子机制是：减少Caspase-3的表达。

目录

文摘

英文文摘

声明

引 言

理论探讨

1焦虑症的中医研究概况

1.1古代医籍的有关记载

1.2病因病机

1.3证治研究

1.4中医药防治焦虑症存在的问题和展望

2酸枣仁汤的组方配伍机制

2.1组成与用法

2.2功能与主治

2.3组方药物述要

2.4组方配伍意义

2.5组成药物药理学研究

2.6复方药理学研究

实验研究

1实验材料

1.1实验动物

1.2实验用药

1.3试剂和仪器

1.4 PC12细胞培养

1.5酸枣仁汤含药血清制备

1.6皮质酮浓度的选择

2实验设计

2.1实验细胞分组与给药

2.2图片、数据的统计处理

3实验方法与结果

3.1实验一SZRT含药血清对CORT干预的PC12细胞增殖的影响

3.2实验二SZRT含药血清对CORT诱导的PC12细胞凋亡的影响

3.3实验三SZRT含药血清对CORT损伤的PC12细胞内Caspase-3的影响

3.4实验四SZRT含药血清对CORT损伤的PC12细胞内Bcl-2的影响

3.5实验五SZRT含药血清对CORT损伤的PC12细胞内NF-κB的影响

4讨论

4.1对CORT干预的PC12细胞增殖的影响

4.2对CORT诱导的PC12细胞凋亡的影响

4.3对Caspase-3表达的影响

4.4对Bcl-2、NF-κB表达的影响

结 语

参考文献

附 录

致 谢