骨髓基质干细胞凝胶复合体加关节止痛胶囊修复兔膝软骨缺损的实验研究

摘要

目的:探讨关节止痛胶囊对骨髓基质干细胞凝胶复合体修复兔膝关节软骨缺损的影响。
　　方法:采用密度梯度离心+贴壁培养法分离、纯化和扩增BMSCs,取第三代BMSCs制备纤维蛋白凝胶复合体。实验将40只新西兰兔,随机分为四组:I组缺损不做任何处理;II组缺损中植入未加细胞因子的凝胶复合体;III组和IV组缺损种植入含细胞因子的凝胶复合体,II组和IV组每天关节止痛胶囊灌胃。分别于术后第4、8、12周后取材,进行大体及组织学观察。
　　结果:BMSCs增殖速度快,易扩增可获取足够数量的细胞来修复软骨缺损。术后12周, IV组缺损完全由透明软骨组织填充,软骨细胞排列规则,新生软骨的厚度与正常软骨厚度基本相同。
　　结论:骨髓基质干细胞凝胶复合体加关节止痛胶囊能修复关节软骨缺损,关节止痛胶囊在体内可以诱导骨髓基质干细胞向软骨细胞分化,促进凝胶复合体修复软骨缺损。

目录

提要

Abstract

引言

材料与方法

一、主要实验材料

二、主要器材设备

三、实验步骤简图

四、骨髓基质干细胞的培养与扩增

（一） 取材

（二） 接种

（三） 传代

五、骨髓基质干细胞复合体的制备

（一） 骨髓基质干细胞悬液的制备

（二） 纤维蛋白原细胞悬液的制备

（三） 凝血酶溶液的制作

（四） 凝胶复合体的制作

六、兔膝关节软骨缺损模型的制备和细胞凝胶复合体的植入

七、实验分组

八、观测内容

（一） 动物术后观察

（二） 大体标本观察

（三） 组织学切片观察

九、统计学分析

结果

一、兔骨髓基质干细胞的原代和传代培养

二、新西兰兔术后观察

三、大体标本观察

（一） 术后4 周

（二） 术后8 周

（三） 术后12 周

四、组织学观察

（一） 术后4 周

（二） 术后8 周

（三） 术后12 周

（四） 组织学评分结果比较

讨论

一、骨髓基质干细胞的特性、培养和诱导分化

（一） 骨髓基质干细胞（BMSCS）概况

（二） BMSCS 的分离培养

（三） BMSCS 的体表标志物

二、支架材料的选择与构建

三、细胞因子的选择

（一） 转化生长因子（TGF-Β）

（二） 胰岛素样生长因子（IGF）

（三） 骨形态发生蛋白（BMPS）

四、关节止痛胶囊的组方原则与现代药理研究

（一） 方药分析

（二） 关节止痛胶囊的药理研究

结语

参考文献

附录

综述

致谢