经前期综合征肝气郁证模型大鼠中枢不同脑区ERα和ERβmRNA表达

摘要

目的：在前期工作的基础上，参照国外研究成果采用居住入侵造模法制备经前期综合征（premenstrual syndrome，PMS）肝气郁证大鼠模型并与先前的束缚造模法进行比照；检测PMS肝气郁证模型大鼠中枢不同脑区（下丘脑、边缘叶、额叶大脑皮层和海马）内ERα和ERβmRNA表达的变化，探讨PMS肝气郁证发病的微观机制，并研究中药经前舒颗粒对其的干预作用。 方法：以束缚造模法和居住入侵造模法复制PMS肝气郁证大鼠模型，采用细胞涂片法观察大鼠阴道细胞形态，确定动情周期后分别在大鼠的接收期和非接受期进行行为学评价，采用半定量RT-PCR基因扩增技术对正常对照组、PMS肝气郁证模型1组（束缚造模组）、模1给药组（束缚造模给药组）、PMS肝气郁证模型2组（居住入侵造模组）、模2给药组（居住入侵造模给药组）大鼠不同脑区中ERα和ERβmRNA表达变化进行检测。 结果：束缚造模法和居住入侵造模法均能够有效模拟人类的经前抑郁，经后抑郁症状消失的状态，旷场实验结果显示两种方法间并无显著性差异（P>0．05），利用RT-PCR方法检测各组大鼠边缘叶、下丘脑、皮层及海马脑组织ERα和ERβ基因表达变化，研究显示，与正常组大鼠相比，束缚模型组和居住入侵模型组大鼠下丘脑、边缘叶、皮层和海马组织ERα和ERβmRNA表达显著升高（P<0．05），且两种模型大鼠各脑区的ERα和ERβmRNA表达并没有差异，调肝方药经前舒颗粒干预可改变ERα和ERβmRNA表达水平升高的状态。 结论：居住入侵作为一种社会心理应激造模法能更好地模拟临床情志异常引发PMS肝气郁证的过程，但采用居住入侵法制备模型的造模成功率低（造模成功率为22．5%），而且模型稳定性方面也有待于进一步考查。大鼠四个脑区中ERα和ERβmRNA表达升高可能与PMS肝气郁证关系密切，提示PMS肝气郁证的发生可能与这四个脑区ERα和ERβmRNA表达异常升高相关；中药经前舒颗粒对该病证模型大鼠上述脑组织内ERα和ERβmRNA表达量的调节，可能是该药治疗PMS肝气郁证的重要作用机制之一。

目录

文摘

英文文摘

声明

引言

材料与方法

1材料

1.1实验动物

1.2药品与试剂

1.3实验仪器

2方法

2.1大鼠模型制备

2.2造模后行为学测定

2.3取材

2.4大鼠脑组织总RNA抽提

2.5对RNA进行纯化

2.6反转录(RT)

2.7 PCR扩增

2.8琼脂糖凝胶电泳

2.9检测

2.10统计方法

3结果

3.1行为学指标结果

3.2中枢测定结果

讨论

1关于经前抑郁的病因学认识

1.1现代医学对经前抑郁的病因学认识

1.2中医学对经前抑郁的的病因学认识

2证的动物模型研究

3两种造模方法制备PMS肝气郁证大鼠模型的探讨及行为学评价的建立

3.1束缚应激制备PMS肝气郁证大鼠模型的探讨

3.2居住入侵法制备PMS肝气郁证大鼠模型的探讨

3.3两种造模方法制备PMS肝气郁证大鼠模型宏观表现量化评价

4雌激素及其受体与PMS肝气郁证的关系

5问题和展望

结语

参考文献

附录：缩写词表

致谢

附录 综述：雌激素及其受体与经前抑郁情绪关系的研究进展