舒郁胶囊对抑郁情绪模型大鼠不同脑区5-HT3B受体分布与表达的影响

摘要

目的:检测抑郁情绪模型大鼠脑区额叶皮质、顶叶皮质、海马和下丘脑相关区域内5-HT3B受体(5-HT3BR)蛋白分布、表达的变化,初步探讨抑郁情绪发病的中枢机制,并研究中药舒郁胶囊对该病证的干预作用。
　　方法:筛选大鼠进入实验,采用慢性温和应激法(CMS)复制抑郁情绪大鼠模型,以糖水偏好实验、旷场试验和宏观行为表现评价模型,以西药氟西汀为阳性药,采用免疫荧光法检测正常对照组、抑郁情绪模型组、舒郁胶囊给药组和氟西汀西药给药组大鼠额叶皮质、顶叶皮质、海马和下丘脑中5-HT3BR的定位分布,并定量检测海马与下丘脑中5-HT3BR的表达。
　　结果:与正常组大鼠相比,模型组大鼠体重显著减轻(P＜0.01),旷场实验水平得分、垂直得分、旷场实验总分均显著减少(P＜0.01),糖水偏好实验糖水摄入量显著减少(P＜0.01),大鼠表现出精神萎靡,眼神呆滞,对外界刺激不敏感的状态;而造模并给予舒郁胶囊和氟西汀的大鼠较模型组大鼠体重增长显著(P＜0.05),旷场实验三项得分均显著增加(P＜0.01),糖水偏好实验中饮糖水量显著增加(P＜0.01),但两组之间都没有显著性差异(P＞0.05)。免疫荧光结果显示,四组大鼠额叶皮质、顶叶皮质、海马、下丘脑中5-HT3BR的定位分布无显著性差异。与正常组大鼠相比,模型组大鼠海马CA1、CA3与下丘脑VMH区5-HT3BR平均荧光强度(MFI)显著升高(P＜0.05或P＜0.01),额叶皮质、顶叶皮质5-HT3BR有升高的可能。造模并给予舒郁胶囊和氟西汀治疗的大鼠与模型组相比,海马CA1、CA3与下丘脑VMH区5-HT3BR平均荧光强度(MFI)显著降低(P＜0.01),两组间没有显著性差异(P＞0.05),额叶皮质、顶叶皮质5-HT3BR有降低的可能。
　　结论:采用慢性温和应激法可以成功制备抑郁情绪大鼠模型,糖水偏好实验、旷场试验结合宏观行为药理学可有效评价模型。大鼠额叶皮质、顶叶皮质、海马CA1、CA3、下丘脑VMH区5-HT3BR蛋白表达升高可能与抑郁情绪关系密切,可能是抑郁情绪发病的中枢机制之一;中药舒郁胶囊可以有效纠正模型大鼠上述脑区5-HT3BR蛋白表达异常升高的状态,可能是该药治疗抑郁情绪的机制之一。

目录

摘要

Abstract

引言

材料与方法

1 材料

1.1 实验动物

1.2 药品及试剂

1.3 仪器及器材

1.4 相关溶液配制

1.5 玻片处理

2 方法

2.1 大鼠模型制备

2.2 大鼠脑组织取材

2.3 石蜡切片制备

2.4 免疫荧光化学反应

2.5 检测及数据分析

2.6 统计方法

结果

1 宏观指标结果

1.1 各组大鼠体质量比较

1.2 各组大鼠糖水偏好值比较

1.3 各组大鼠旷场实验行为学得分比较

1.4 大鼠宏观表现观察

2 免疫荧光检测结果

2.1 各组大鼠不同脑区5-HT_(3B)R 的定位分布

2.2 各组大鼠海马CA1 神经元形态的变化

2.3 各组大鼠额叶、顶叶皮质、海马、下丘脑5-HT_38R 受体阳性细胞相对荧光强度比较

讨论

1 情志病证与抑郁

1.1 情志病证的概述

1.2 抑郁情绪与情志病症

1.3 抑郁情绪的发病机理

2 与情绪关系密切的脑区

2.1 额叶、顶叶皮质

2.2 海马

2.3 下丘脑

3 抑郁情绪模型大鼠的造模及评价

3.1 慢性温和应激法制备抑郁大鼠模型

3.2 体质量测量结果分析

3.3 糖水偏好实验结果分析

3.4 旷场实验和宏观行为药理学结果分析

4 5-HT_3R 及其与抑郁情绪的关系

4.1 5-HT_3R 的结构

4.2 5-HT_3R 在脑内的分布

4.3 5-HT_3R 与抑郁情绪的关系

5 问题与展望

5.1 抑郁情绪造模方法及其评价

5.2 舒郁胶囊有效成分对抑郁治疗作用的机制

结语

参考文献

综述

参考文献

致谢