急性低氧环境下HSP72蛋白在大鼠肾脏中的表达及意义

摘要

目的：利用低压氧舱模拟急性低氧环境，复制急性缺氧动物模型，探讨急性低氧环境下大鼠肾脏热休克蛋白72（heat shock protein,HSP72）的表达及意义。
　　方法：30只健康雄性SD大鼠，体重均在180g~220g之间，随机分为急性低氧组，分别为：12h、24h、48h、72h、1周组，模拟海拔高度为5000m，同时设立对照组（西宁地区）。SD大鼠适应性喂养2周后，将其中五组大鼠放入低压氧舱建立急性低氧动物模型，一组放于动物房普通饮食饲养。分别在不同时间段从低压氧舱内取出各组大鼠，即刻进行取材：20％乌拉坦（1ml/100g）经腹腔注入麻醉大鼠后，充分暴露腹腔，摘取双侧肾脏。大鼠肾脏组织用蛋白免疫印迹（Western Blotting）法检测HSP72蛋白的表达水平；同时膀胱穿刺留取各组大鼠尿液，离心后吸取上清液，用酶联免疫吸附测定法（ELISA法）检测大鼠尿微量白蛋白及尿肌酐浓度。
　　结果：低压氧舱内模拟大鼠急性缺氧后，可见各低氧组大鼠肾组织中HSP72蛋白的表达水平明显高于对照组，而对照组几乎很少表达，随着缺氧时间的延长，大鼠肾组织中HSP72蛋白的表达水平逐渐增高，于72h达最高水平（2.68±0.08），到1周时其表达水平有所下降（1.59±0.17），各组与对照组（0.19±0.12）比较差异均有统计学意义（P<0.01）；分别测定各组大鼠尿微量白蛋白及尿肌酐的含量，然后求其比值，结果提示尿微量白蛋白与尿肌酐比值从48h开始升高，48 h（235.40±20.60）、72 h（378.12±61.31）、1周组（504.55±48.77）与对照组（169.63±17.45）比较差异有统计学意义（P<0.05）。
　　结论：急性低氧可以引起大鼠尿微量白蛋白排泄量增加，并随着缺氧时间的延长而增加，同时伴有肾脏HSP72蛋白表达的增加，但二者表达呈现不一致性。提示缺氧是引起肾脏损伤的重要原因，虽然HSP72升高是机体保护性应激反应，但在急性缺氧时，并不能充分缓解缺氧引起的脏器损伤，其保护作用可能具有一定的滞后性。

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主要符号对照表

第1章 前 言

第2章 材料与方法

2.1 材料

2.1.1 实验动物

2.1.2 主要试剂：

2.1.3 主要仪器

2.2 方法

2.2.1 动物分组及标本采集

2.2.2检测尿微量白蛋白、尿肌酐的浓度：ELISA双抗夹心法

2.2.3 蛋白免疫印迹法检测HSP72

2.3 统计学处理

第3章 结 果

3.1 各组大鼠尿微量白蛋白与尿肌酐比值

3.2 蛋白免疫印迹法 （Western Blotting）检测各组大鼠HSP72蛋白表达

第4章 讨 论

第5章 结 论

参考文献

致谢

综述: 高原低氧环境下HSP72对肾脏的保护作用

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