盐胁迫下盐地碱蓬液泡膜质子泵表达分析及过量表达SsNHX1-AVP1对拟南芥耐盐性的影响

摘要

盐分胁迫主要包括渗透胁迫及离子胁迫.渗透胁迫、离子胁迫及其造成的一系列次级胁迫如氧化胁迫等,严重干扰植物体内业已存在的细胞及整株水平上的水分及离子稳态,造成植物细胞分子损伤,生长减缓甚至死亡.因而植物对抗盐胁迫的一个重要策略是在高盐环境下重建体内的稳态(homeostasis),包括重建离子稳态(ionichomeostasis)和渗透稳态(osmotic homeostasis).该实验以典型的积盐型盐生植物盐地碱蓬为材料,探讨了盐对盐地碱蓬液泡膜H<'+>-ATPase、H<'+>-PPase基因及蛋白表达的影响,分析了液泡膜H<'+>-ATPase、H<'+>-PPase、Na<'+>/H<'+> antiporter对Na<'+>液泡区隔化的作用;构建了同时含有液泡膜H<'+>-PPase与Na<'+>/H<'+>antiporter基因的双元植物表达载体并转化拟南芥;分析了同时过量表达SsNHX1-AVP1基因对拟南芥耐盐性的影响,主要实验结果如下:1.盐地碱蓬液泡膜H<'+>-ATPaseB、H、c亚基基因克隆及序列分析利用EST随机挑取克隆测序的策略从盐地碱蓬叶片cDNA文库分离得到编码盐地碱蓬液泡膜H<'+>-ATPaseB、H、c亚基的全长cDNA序列.盐地碱蓬液泡膜H<'+>-ATPaseB亚基是由1470个核苷酸编码的长达489个氨基酸的多肽,分子量约54.29 kDa,存在保守的ATP结合序列