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加减驻景方对病理性近视脉络膜新生血管VEGF表达的影响

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引言

第二章 材料与方法

1 动物

2 试剂

3 仪器

4 动物造模

4.1形觉剥夺诱导高度近视

4.2激光造模

4.3给药

5 检测指标

5.1视网膜检影

5.2 脉络膜铺片

5.3 冰冻切片

5.4 HE 染色:

5.5免疫荧光

5.6免疫组化

5.7 RT-PCR

6 统计学方法

第三章 结果

1 视网膜检影及A超

2 脉络膜铺片

3 HE染色

4 免疫荧光

5 免疫组化

6 组织中VEGF的表达水平

附录

第四章讨论

第五章结论

参考文献

致谢

综述

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摘要

目的:观察中药驻景方对氪激光诱导的病理性近视脉络膜新生血管VEGF表达的影响,探讨中药驻景方对病理性近视脉络膜新生血管的干预作用。
  方法:将3周大雌性三色豚鼠105只随机选出15只为空白对照组,剩余豚鼠均带头套右眼形觉剥夺诱导病理性近视,A超检影(诱导失败者剔除出组)并随机分为模型组、中药组,每组各45只,双眼行氪激光光凝。中药组于光凝后第二天开始连续灌胃,1次/d。模型组及中药组组分别于7d、14d、21d各处死15只,空白组处死5只,并行脉络膜铺片、HE染色、免疫荧光、免疫组化及RT-PCR观察。
  结果:1.形觉剥夺4w后,模型组及中药组右眼诱导高度近视成功,眼轴也明显增长,差异有统计学意义。模型组脉络膜铺片7d可见CNV生长,14d时CNV面积最大,21dCNV面积逐渐减小,且右眼CNV面积均大于左眼。免疫荧光可见7d时模型组视网膜色素上皮层及脉络膜VEGF阳性信号表达,14d时增强,21d表达逐渐减弱。
  2.脉络膜铺片示中药组右眼CNV的面积较模型组小;免疫荧光可见中药组右眼视网膜色素上皮-脉络膜层阳性信号表达较模型组右眼减少。免疫组化结果示中药组14d、21d视网膜及脉络膜VEGF的表达较模型组减少(P<0.01)且RT-PCR示VEGF mRNA的表达较模型组减少。
  结论:中药驻景方可抑制氪激光诱导的病理性近视脉络膜新生血管VEGF的表达,从而抑制脉络膜新生血管的形成。

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