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益气润目汤对高渗盐水诱导的干眼模型炎症因子的干预作用

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第1章 引言

1.1 现代医学对干眼的认识

1.2 中医对干眼的认识

1.3 本课题经验中药方-益气润目汤的临床疗效观察

1.4 益气润目汤的释义

1.5 益气润目汤的组成药物的现代药理研究

1.6 本研究实验动物的选择

1.7 本研究的目标

第2章 材料与方法

2.1 材料

2.2 方法

2.3 统计学方法

第3章 结果

3.1 泪液蕨类实验检测结果

3.2 泪液分泌量检测结果

3.3 角膜荧光染色及评分检测结果

3.4 角膜上皮HE染色观察益气润目汤对角膜的影响

3.5 结膜上皮PAS染色观察益气润目汤对结膜杯状细胞的作用

3.6 益气润目汤对角膜组织中促炎因子IL-1β、P-JNK的影响

3.7 益气润目汤对角结膜组织中IL-1β的表达水平的影响

第4章 讨论

结论

参考文献

致谢

附录A 附图

附录B: 综述 干眼动物造模的研究进展

作者简历

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摘要

目的:评价益气润目汤对高渗盐水诱导的干眼的疗效,探讨其潜在作用机制。
  方法:6~8周龄(18-22g)雌性BALB/c小鼠96只,裂隙灯显微镜、眼底镜检查眼前节及眼底无异常,泪液分泌及角膜荧光染色未见异常。将小鼠随机分为6组,每组16只,除空白对照组,剩余小鼠均采用高渗盐水点眼14天诱导干眼动物模型,通过泪液分泌、角膜荧光染色检查,诱导失败剔除出组,诱导成功后,随机分为高渗盐水滴眼组(HO组)、高渗联合中药高剂组(HO+HD组)、高渗联合中药中剂组(HO+MD组)、高渗联合中药低剂组(HO+LD组)、高渗联合玻璃酸钠滴眼液组(HO+SH组)。HO+HD组、HO+MD组、HO+LD组灌胃益气润目汤,1次/d,持续14天;HO+SH组点玻璃酸钠滴眼液,3次/d,持续14天;治疗7d、14d每组处死8只,并行石蜡病理切片、HE染色、PAS染色、免疫组化及RT-PCR观察。
  结果:1.高渗盐水点眼14d后,除空白对照组,余组小鼠泪液明显减少,角膜染色出现点片状着色增多,P<0.05,差异有统计学意义;2.治疗后,中药各组与HO组比较,泪液明显增多,角膜染色评分减少,P<0.05,差异有统计学意义;病理切片HE染色:HO组可见角膜厚度变薄,角膜上皮层细胞数目减少,细胞排列紊乱,甚有空泡样改变,余组改变不明显;PAS染色:中药组上方穹窿结膜杯状细胞数量较HO组增多;免疫组化结果:中药各组治疗7d、14d角膜上皮IL-1β、P-JNK阳性表达较与HO组比较,P<0.05,RT-PCR:IL-1βmRNA的表达与HO组比较,P<0.05,差异有统计学意义。
  结论:1.通过高渗盐水诱导的小鼠成功建立了干眼模型;2.益气润目汤能促进泪液分泌,稳定泪膜,改善干眼病情,机制可能是通过下调眼表炎症因子的表达来保护眼表屏障,维持泪液分泌的质与量。

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