慢性高原病患者骨髓CD71+、CD235a+有核红细胞增殖、凋亡能力研究

摘要

目的：研究CMS患者骨髓CD71+、CD235a+有核红细胞增殖、凋亡，并加入PD98059观察其对有核红细胞的作用，以期了解CMS的发病机制，并且为CMS的治疗提供新的方法。
　　方法：采用免疫磁珠法分选16例CMS患者及16例健康对照组患者骨髓CD71+、CD235a+有核红细胞。分为加抑制剂组与未加抑制剂组，其中抑制剂组分别加入5、10、20μmol/L PD98059及DMSO溶剂对照,两组均低氧培养72h，以Annexin V/PI双染法测定细胞凋亡，CCK-8法检测细胞增殖；同时观察加抑制剂组与未加抑制剂组CD71+、CD235a+有核红细胞及BMMNCs克隆形成能力。
　　结果：①CMS患者骨髓CD71+、CD235a+有核红细胞Annexin V阳性细胞比例较对照组降低（P<0.05），加入 PD98059后凋亡比例随着浓度的增加而上升（r=0.807P<0.01）。②CMS患者骨髓CD71+、CD235a+有核红细胞增殖比例增加（P<0.05），加入PD98059后增殖比例随浓度的增加而下降（r=-0.305，P<0.01）。血红蛋白与有核红细胞增殖程度无明显相关性（r=0.014，P=0.967）。③CMS患者 CD71+、CD235a+有核红细胞集簇形成率7、14d与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。④CMS患者BMMNCs红系集落形成率7和14d均比对照组要高（P<0.05）；加入PD98059后CMS患者BMMNCs红系集落形成率随浓度增加下降（r=-0.405，P<0.01），7和14d时各组比较均有统计学意义（P<0.05）。
　　结论：①CMS患者骨髓CD71+、CD235a+有核红细胞增殖增加、凋亡减少。②MEK特异性抑制剂PD98059对CMS患者CD71+、CD235a+有核红细胞具有抑制增殖、促进凋亡作用，对红细胞的过度积累有一定抑制作用。

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主要符号对照表

第1章 引言

第2章 对象与方法

2.1 研究对象

2.2主要试剂与仪器

2.2.1主要试剂

2.2.2主要试剂制备

2.2.3仪器

2.3标本采集

2.4实验方法与原理

2.4.1磁珠分选及细胞培养

2.4.2Annexin V/PI测细胞凋亡

2.4.3 CCK-8法测细胞增殖

2.4.4红系集落形成实验

2.4.5 统计学方法

第3章 结果

3.1 患者一般情况比较

3.2 流式法测细胞纯度结果

3.3Annexin V/PI双染法测细胞凋亡结果

3.4 CCK-8增殖检测结果

3.5红系集落形成实验

3.5.1 骨髓CD71+、CD235a+细胞集簇培养对比

3.5.2 BMMNCs 集落培养对比

3.5.3 CMS组BMMNCs加PD98059后集落培养对比

3.5.4 对照组BMMNCs加PD98059集落培养对比

3.5.5 CMS组与对照组患者BMMNCs加PD98059集落培养对比

第4章 讨论

第5章 结论

参考文献

致谢

附录一综述：FoxO转录因子与红细胞信号通路研究进展

附录二

作者简介