某院2005-2008年344株临床分离葡萄球菌耐药分子流行病学研究

摘要

目的：通过K-B法药敏试验、多重PCR、统计学分析软件等研究某综合教学三级甲等医院2005－2008年临床分离344株葡萄球菌属细菌标本类型、临床分布、耐药表型、耐药分子机制等，以期获得该院3年来葡萄球菌属细菌耐药趋势及分子流行病学等重要数据，为临床细菌学诊断、抗生素合理应用及院感监测预防等提供相应的科学指导。
　　 方法：对所收集的2005年9月-2008年2月344株葡萄球菌(-70℃冷冻保藏)，采用K-B法进行27种抗生素药敏试验和红霉素对克林霉素诱导耐药(D-试验)检测；多重PCR法扩增mecA+femB、pvl、qacA/B、 ermA、ermB、ermC、msrA、msrB和linA/linA'等基因，利用WHONET 5.4、SPSS 11.5等软件分析以上检测结果数据。
　　 结果：以PCR检测结果为金标准分析344株葡萄球菌， MRSA、MSSA 、MRCNS、MSCNS分别是97、60、144和43 株，WHONET分析结果显示，标本主要来源于痰液和创面分泌物/脓液，科室分布前五位的是烧伤科、儿科、ICU、呼吸科、急诊科，分别占22.39％、20.06％、6.98％、6.39％、6.39％；27种抗生素药敏试验结果显示，葡萄球菌对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺100％敏感，MRS对其中19种抗生素耐药率超过50％；头孢西丁、苯唑西林纸片法及PCR法对MRSA检出率分别为65.61％(103/157)，66.24％(104/157)，61.78％ (97/157)，三种方法对MRSA检出率没有统计学差异(P＞0.05)；157株金黄色葡萄球菌(SA)mecA+femB基因检出97株(61.8％)，187株凝固酶阴性葡萄球菌(CNS) mecA+femB基因检出144株(77.0％)；大环内酯类耐药基因检出分别是ermA 9株、ermB 2株、ermC 48株、msrB11株、全部阴性的5株，克林霉素诱导耐药基因linA/linA'64株，D试验阳性率18.3％；ermC基因是诱导耐药的主要基因，占75.0％；linA/linA'100％检出；SA菌MRSA pvl基因检出率11.3％，MSSA pvl基因检出率25％，qacA/B基因检出率MRSA(8.2％)略高于MSSA(6.7％)，CNS菌qacA/B基因检出率MRCNS(45.1％)远高于MSCNS (16.3％)。
　　 结论：本课题对某综合教学三级甲等医院2005－2008年临床分离344株葡萄球菌标本类型、临床分布、耐药表型、耐药分子机制等进行了系统性研究，利用头孢西丁、苯唑西林、PCR法对MRSA的检出率均在60％以上，提示临床烧伤、儿科等科室需加强和重视对MRSA的防范；药敏及基因检测结果显示，葡萄球菌一旦携带mecA基因，仅对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺等抗生素敏感；另外，ermC和linA/linA’是该院红霉素对克林霉素诱导耐药的主要分子机制，三种检测方法比较和基因检测，提示分子检测应为临床提供更快捷全面的检测信息，方便临床及时应用或更换药物；葡萄球菌携带pvl及qacA/B基因检出，是院感院监测、防控的重点，同时针对以上信息来制定该院MRS防控手册以加强对葡萄球菌医院感染的预防控制能力；目前，宁夏地区尚未开展细菌耐药的分子研究，本课题将弥补本地区该研究空白，提升宁夏地区临床检验诊断学、分子生物学学科及其研究领域在国内的水平，为最终建立的MRSA耐药、防控模式和宁夏地区“细菌耐药监测网”奠定基础。