氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸损伤的保护作用及其机制研究

摘要

目的:通过建立雄性糖尿病大鼠生殖损伤的模型，观察氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸损伤的保护作用，并探讨氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸损伤保护作用的可能机制。
　　方法:选用SPF级雄性SD大鼠86只，随机取10只做为正常对照组，其余大鼠均腹腔注射STZ（65mg/kg）诱导糖尿病大鼠模型。将造模成功大鼠按血糖、体重均匀分为糖尿病模型对照组(DM)、氟伐他汀（6、18mg/kg）组和胰岛素组。氟伐他汀组每天灌胃1次，正常对照组及糖尿病模型组给予等体积生理盐水灌胃，胰岛素组给予精蛋白锌胰岛素皮下注射2U·kg-1·d-1，连续给药8周。8周末，处死动物，留取血清及睾丸组织，行血清睾酮（T）、睾丸组织MDA、SOD、GSH-Px检测，并在光镜下观察HE染色、TUNEL染色及免疫组织化学(Bcl-2,Bax)等指标，透射电镜下观察睾丸组织超微结构改变。
　　结果:
　　1.氟伐他汀对糖尿病大鼠一般情况的影响：实验期间，糖尿病模型组大鼠除“三多一少”现象外，还出现多系统并发症的表现，死亡较多（41.6％）；与糖尿病组比较，氟伐他汀各剂量组对外界反应相对灵敏，并发症程度较轻，死亡相对较少（36.4%和27.3%）；胰岛素组大鼠的一般情况明显改善，死亡较少（27.3%）。
　　2.氟伐他汀对糖尿病大鼠血糖、体重的影响：经8周药物干预后，糖尿病组大鼠空腹血糖显著高于正常组（P＜0.01）；氟伐他汀各组空腹血糖较糖尿病组有不同程度的下降（P＜0.01）；胰岛素组与正常组空腹血糖无显著性差异（P＞0.05）。与正常组相比，糖尿病组大鼠体重显著减轻（P＜0.01）；氟伐他汀各组与糖尿病组大鼠体重无显著性差异（P＞0.05）；胰岛素组大鼠体重较糖尿病组显著增加（P＜0.01），但不及正常组（P＜0.01）。
　　3.氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸质量、睾丸脏器系数的影响：糖尿病组大鼠睾丸质量、脏器系数较正常组显著降低（P＜0.01）；氟伐他汀各组睾丸质量及脏器系数高于糖尿病组，且18mg/kg组与糖尿病组存在显著性差异（P＜0.01）；胰岛素组大鼠睾丸质量低于正常组（P＜0.01），但两组脏器系数无显著性差异（P＞0.05）。
　　4.氟伐他汀对糖尿病大鼠精子参数的影响：糖尿病组大鼠精子数量、精子活率显著少于正常组（P＜0.01）；氟伐他汀6mg/kg组精子数量、精子活率与糖尿病组无显著性差异（P＞0.05），氟伐他汀18mg/kg组精子数量、精子活率均较糖尿病组显著增高（P＜0.05或P＜0.01），但不及胰岛素组（P＜0.01）。胰岛素组精子数量、精子活率低于正常组（P＜0.01）。
　　5.氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸组织HE染色的影响：光镜下，正常组大鼠睾丸曲细精管饱满，各级生精细胞排列整齐，管腔内可见密集精子；糖尿病模型组大鼠曲细精管明显萎缩，生精细胞脱落、数量显著减少，大部分管腔内未见精子；氟伐他汀组曲细精管结构基本完整，6mg/kg组管腔内可见精子细胞核分裂像，18mg/kg组管腔内可见少量精子；胰岛素组曲细精管及各级生精细胞形态基本正常，管腔内可见较多精子。
　　6.氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸生精细胞TUNEL染色的影响：凋亡细胞表达糖尿病组最多，并显著高于其余各组（P＜0.01）；氟伐他汀干预后，凋亡生精细胞数量较糖尿病组明显减少（P＜0.01），且18mg/kg组优于6mg/kg组，但不及胰岛素组；胰岛素组凋亡细胞数量与正常组相近（P＞0.05）。
　　7.氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸组织电镜下超微结构的影响：糖尿病组大鼠睾丸间质细胞体积缩小，细胞质减少，线粒体减少、嵴溶解，内质网扩张，脂滴增加，间质细胞核固缩，染色质呈块状浓集；间质微血管内皮细胞增生、肿胀，基底膜显著增厚，可见大量纤维素样物质沉积。氟伐他汀组间质细胞细胞器增多，线粒体嵴结构较清晰，内质网增多，脂滴减少，细胞核染色质浓集、边集现象好转；间质微血管管腔通畅，血管内皮细胞形态明显好转，血管基底膜增厚现象明显减轻，纤维素样沉积明显减少，且18mg/kg组优于6mg/kg组，接近于正常组。胰岛素组间质细胞、间质微血管超微结构与正常组接近。
　　8.氟伐他汀对糖尿病大鼠血清睾酮的影响：糖尿病组大鼠睾酮水平较正常组显著降低（P＜0.01）。氟伐他汀18mg/kg组睾酮水平较糖尿病组显著增高（P＜0.01），但不及胰岛素组；胰岛素组睾酮水平低于正常组（P＜0.05）。
　　9.氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸组织SOD、GSH-PX活性和MDA含量的影响：与正常组大鼠相比，糖尿病模型组大鼠SOD水平显著降低（P＜0.01）、GSH-PX、MDA水平显著增高（P＜0.01）；与糖尿病组大鼠相比，氟伐他汀各组SOD水平显著增高（P＜0.01或P＜0.05），GSH-PX水平、MDA水平显著下降（P＜0.05或P＜0.01）；氟伐他汀各组SOD、GSH-PX、MDA水平与胰岛素组间无显著性差异（P＞0.05）。
　　10.氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸生精细胞Bax，Bcl-2免疫组化阳性细胞表达的影响：在正常组中，Bcl-2表达最明显，Bax表达最少，而糖尿病组较其余各组Bcl-2表达显著减少（P＜0.01），Bax表达显著增加（P＜0.01）；氟伐他汀治疗组较糖尿病组Bcl-2表达显著增加，Bax表达显著减少（P＜0.01），且18mg/kg组优于6mg/kg组。胰岛素组较氟伐他汀组Bcl-2表达增加、Bax表达减少（P＜0.01），但与正常组比较还存在显著性差异（P＜0.01）。
　　结论:
　　1.氟伐他汀可减轻糖尿病大鼠的睾丸损伤，对睾丸组织具有保护作用。
　　2.氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸损伤的保护作用机制可能与减轻糖尿病大鼠睾丸组织氧化应激水平以及调节生精细胞Bax，Bcl-2阳性细胞表达等有关。

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前言

材料与方法

1实验材料

2 实验方法

结 果

1.氟伐他汀对糖尿病各组大鼠一般情况的影响

2.氟伐他汀对糖尿病大鼠血糖、体重的影响

3.氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸质量、睾丸脏器系数的影响

4.氟伐他汀对糖尿病大鼠精子参数的影响

5.氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸组织HE染色的影响

6.氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸生精细胞TUNEL染色的影响

7.氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸组织电镜下超微结构的影响

8.氟伐他汀对糖尿病大鼠血清睾酮的影响

9.氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸组织SOD、GSH-PX活性和MDA含量的影响

10.氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸生精细胞Bax，Bcl-2免疫组化阳性细胞表达的影响：

讨论

1.实验性糖尿病大鼠生殖系统损伤动物模型的建立

2.氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸损伤的保护作用

3.氟伐他汀抗糖尿病大鼠睾丸损伤作用的可能机制

4.展望—氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸间质血管的保护作用的可能机制

结 论

附图及照片

参考文献

文 献 综 述

致谢

攻读学位期间发表的学术论文

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