突触外GABAA受体的δ、α5亚基在大鼠岛叶癫痫模型海马中的表达

摘要

目的：电刺激 Sprague-Dawley大鼠岛叶皮质，建立慢性电点燃模型，观察突触外GABAA受体的δ、α5亚基 RNA及相关蛋白在海马的表达变化，探讨突触外GABAA受体的δ、α5亚基在岛叶癫痫发生发展中的作用。为进一步研究岛叶癫痫的发病机制提供理论依据。
　　方法：1.动物分组:健康雄性SD大鼠48只，随机分成3组，点燃组、假手术组、正常对照组，每组8只。2.大鼠岛叶慢性电点燃癫痫模型的建立：点燃组、假手术组均在左侧岛叶颗粒细胞皮质植入双极电极，点燃组先测定大鼠的后放阈，从测定后放阈的第二天起每日2次刺激，刺激时间间隔>1h，刺激参数：强度为后放阈1.5倍，频率60 Hz，波宽1 ms，持续时间1 s。假手术组不进行任何刺激。点燃成功后1个月给予同样的刺激参数，观察模型的稳定情况。3.δ、α5亚基在电刺激大鼠岛叶癫痫模型中的表达：无痛处死大鼠，取脑组织标本，应用尼氏染色检测大鼠海马各区神经元的数目，应用免疫组化染色法、实时荧光定量聚合酶链反应研究电点燃大鼠岛叶模型δ、α5亚基相关蛋白和mRNA在海马中的表达。
　　结果：1.电刺激大鼠左侧岛叶颗粒细胞皮质成功建立了慢性电点燃癫痫模型，安静状态下自由活动的大鼠以及癫痫发作时大鼠岛叶皮层的脑电变化都被记录到，正常大鼠脑电频率较低，通常在10Hz之内，频率低、能量也低，大鼠Ⅴ级发作时的脑电频率增高到30Hz，并且能量也大大增强。通过一段时间的点燃，大鼠都可达到Ⅴ级，点燃大鼠一个月后给予同样的刺激参数均能达到Ⅴ级发作，说明岛叶癫痫动物模型的稳定性良好。
　　2．点燃成功后7d时，尼氏染色检测表明正常大鼠和癫痫大鼠海马各区神经元数目的差异无统计学意义（P>0.05）。免疫组化染色法检测表明δ、α5亚基相关蛋白在海马明显降低（P<0.01）。实时荧光定量PCR检测表明δ、α5亚基RNA在海马明显降低（P<0.01）。
　　结论：δ、α5亚基可能在岛叶癫痫中起着重要作用；δ、α5亚基可能参与了岛叶癫痫的发生、发展过程中。

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前 言

材料和方法

1材料

2 制作模型

3. 实验方法

结 果

讨 论

参考文献

结 论

综 述突触外GABAA受体与癫痫的关系

1.突触外GABAA受体的结构与功能

2.突触外GABAA受体与癫痫的关系

3.岛叶癫痫

4.展望

参考文献

致谢

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