桃[Prunus persica(L.) Batsch]果实非酸/酸性状分子标记的筛选及遗传连锁图的构建

摘要

桃果实的甜酸是影响其风味品质和经济价值的重要因素,它是杂交育种选择中一个重要的衡量标准.在以往的研究中,对果实甜酸性状的遗传知识一直非常有限.控制桃果实非酸(non-acid)性状的是显性主基因D,但目前尚未有与该基因紧密连锁分子标记的报道.该实验利用RAPD、AFLP分子标记,以京玉、美味正反交F<,1>代69株群体为试材,对桃果实的非酸/酸性状进行研究.同时以大久保、兴津油桃杂交F<,2>代109株群体为试材,构建桃的分子标记连锁图谱.

目录

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英文缩略表

摘要

第一章引言

1DNA分子标记

2AFLP分子标记及其在果树遗传育种研究中的应用

2.1AFLP分子标记技术

2.2AFLP在果树遗传育种研究中的应用

3桃遗传学研究进展

4本研究的目的和意义

第二章桃果实非酸/酸性状分子标记的筛选

1材料与方法

1.1植物材料

1.2果实可滴定酸的测定

1.3果实非酸/酸性状的确定

1.4模板DNA的制备

1.5近等基因池的构建

1.6用RAPD技术筛选与桃果实非酸与酸性状连锁的分子标记

1.7用AFLP技术筛选与桃果实非酸与酸性状连锁的分子标记

1.8数据处理

2结果与分析

2.1果实可滴定酸在后代群体中的分布

2.2桃果实非酸/酸性状的RAPD标记筛选

2.3桃基因组AFLP分析技术体系的建立

2.4桃果实非酸/酸性状的AFLP标记筛选

2.5D/d基因连锁群

3讨论

第三章与桃非酸/酸性状连锁的AFLP标记向SCAR标记的转换

1材料与方法

1.1植物材料

1.2模板DNA制备

1.3桃果实可滴定酸测定及非酸/酸性状的确定

1.4AFLP标记片段的回收

1.5AFLP标记片段的克隆、测序

1.6序列分析

1.7SCAR标记的转换

2结果与分析

2.1AFLP特异片段DNA的回收、克隆

2.2重组质粒的PCR鉴定

2.3AFLP标记片段的序列测定

2.4特异片段的序列分析

2.5SCAR引物的设计及特异PCR扩增

2.6SCAR标记在F2代分离群体上的验证

3讨论

第四章桃分子标记遗传连锁图的构建

1材料与方法

1.1植物材料

1.2模板DNA的提取

1.3AFLP分析

1.4RAPD分析

1.5SSR分析

1.6SCAR分析

1.7标记的记载与转换

1.8连锁分析

2结果与分析

2.1亲本的多态性分析

2.2群体中分子标记的分离

2.3遗传连锁图的构建

3讨论

结论

参考文献

图版

附录

致谢

攻读博士学位期间发表的论文