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摘要
Abstract
英文缩略词
第一章文献综述
1.果实中糖的积累与糖代谢酶的研究
2.转化酶的结构，功能及在植物发育和蔗糖积累中的作用
3.甜瓜果实发育过程中糖分转化与酶活性变化的研究进展和展望
4.cDNA文库构建方法的进展
4.1cDNA第一链的合成
4.2cDNA第二链的合成
4.3构建cDNA文库所用载体
第二章甜瓜幼果cDNA文库的构建
1. 材料和方法
1.1实验材料
1.2.实验方法
2.结果与分析
2.1甜瓜总RNA的紫外吸收测定与凝胶电泳鉴定
2.2 双链cDNA的合成与扩增
2.3双链cDNA片段的酶切及分级分离
2.4文库的滴度
2.5文库的检测结果
2.6甜瓜果实酸性转化酶基因cDNA的初步筛选结果
3. 讨论
3.1提高总RNA质量的措施
3.2.全长cDNA文库的建立
3.3 SMART技术在甜瓜上的应用
第三章甜瓜果实酸性转化酶基因cDNA片段的克隆及反义表达载体的构建
1.材料和方法
1.1实验材料
1.2实验方法
2.结果与分析
2.1总RNA的提取结果
2.2甜瓜果实酸性转化酶基因cDNA片段的克隆
2.3克隆cDNA片段的测序及序列分析
2.4 pROK2植物表达载体的构建
2.5甜瓜果实酸性转化酶基因反义表达载体Anti-MAI1的构建
2.6甜瓜果实酸性转化酶基因反义表达载体Anti-MAI2的构建
3. 讨论
3.1关于供试材料和总RNA的提取
3.2关于酶切与连接
3.3关于甜瓜果实酸性转化酶基因cDNA序列分析结果及其利用
3.4关于反义技术在植物基因工程中的应用
第四章遗传转化
1.材料与方法
1.1实验材料
1.2实验方法
2.结果与讨论
2.1氯化钙法将质粒Anti-MAI1和Anti-MAI2转入根癌农杆菌
2.2烟草转化植株PCR和PCR-Southern检测
2.3甜瓜再生植株的获得
2.4不同变种甜瓜在不同处理的培养基的分化结果
2.5农杆菌介导转化甜瓜的初步结果
2.6关于标记基因的切除
2.7继续研究的设想
结论
参考文献:
致谢
攻读博士学位期间发表的学术论文
