中国荷斯坦奶牛催乳素基因5‘调控区多态性及其与产奶性状关系的研究

摘要

实验选用山东济南佳宝牛场和北京市奶牛中心西郊四场共337头中国荷斯坦牛作为实验动物,将催乳素基因作为影响荷斯坦牛产奶性状的候选基因,采用PCR-SSCP和PCR-RFLP分析方法研究牛催乳素基因5'调控区的遗传变异,并克隆出了包括exonI及启动子的5'调控区序列;运用最小二乘线性模型,对所发现的多态位点与奶牛产奶性状的关系进行了分析,探讨了催乳素基因作为影响荷斯坦牛产奶性状候选基因的可能性.

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文摘

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英文缩略词

1.引言

1.1我国奶业生产与奶牛育种的发展现状

1.2分子标记研究概况

1.3主要的分子标记

1.4遗传标记在家畜育种中的应用

1.5奶牛产奶性状的分子遗传标记研究进展

1.6催乳素基因的研究现状

1.7本研究的目的和意义

2.材料与方法

2.1实验材料及其仪器、试剂

2.2实验方法

2.2.1实验牛DNA的提取及检测

2.2.2牛催乳素基因的PCR-RFLP及PCR-SSCP分析

2.2.3牛催乳素基因的PCR-RFLP和PCR-SSCP纯合基因型的克隆测序

2.3数据统计分析

3.结果与分析

3.1从血液中提取的基因组DNA

3.2 牛催乳基因的PCR-RFLP检测及克隆测序

3.3 牛催乳基因5’调控区克隆测序

3.4牛催乳基因的PCR-SSCP分析及克隆测序结果

3.5群体遗传特性分析

3.6 PRL基因XbaI-RFLP多态位点与产奶性状的关系

3.7 PRL基因SSCP多态性与产奶性状的相关分析

3.8 RFLP位点和SSCP位点与总群体产奶量的相关分析

3.9位点组合对总群体产奶量的影响

4.讨论

4.1血液的保存及DNA的提取

4.2关于PCR的影响因素

4.3 PCR-RFLP分析

4.4 PCR-SSCP分析

4.5克隆测序分析

4.6群体遗传特性分析

4.7测序结果讨论

4.8基因型效应与产奶性状相关分析

5.结论

参考文献

附录

致谢

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