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猪LPL和HSL基因的遗传变异及其表达的发育性变化与肌内脂肪关系的研究

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摘 要

1引言

试验一猪LPL和HSL基因表达的发育性变化与肌内脂肪关系的研究

试验二猪LPL基因PCR-RFLP多态性分析

参考文献

致谢

攻读学位期间发表论文情况:

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摘要

本文对猪LPL和HSL基因的遗传变异及其表达的发育性变化与肌内脂肪关系进行了研究。文章运用分子生物学技术对LPL和HSL基因的表达和基因多态性两方面进行研究,为进一步揭示肌内脂肪沉积的遗传机制奠定基础。本研究共分为两部分,试验一是以40-90kg的6个体重组莱芜猪和鲁莱黑猪为试验对象,采用半定量RT-PCR技术研究莱芜猪和鲁莱黑猪肌肉组织LPL和HSL基因表达的发育性变化规律及其与肌内脂肪含量的相关关系。试验二是以莱芜猪、鲁莱黑猪、烟台黑猪和大白猪为试验对象采用PCR-RFLP方法对LPL基因第五内含子进行多态性分析,寻找与肉质性状有关的分子标记。研究结果如下: 莱芜猪与鲁莱黑猪肌肉组织中LPL基因表达的发育性变化趋势基本相似,即随体重的增长,莱芜猪在50-70kg阶段LPLmRNA表达急剧下降(P<0.05),80kg阶段迅速回升出现一个峰值后再次下降;鲁莱黑猪LPL基因的mRNA表达丰度随体重的增加呈缓慢下降趋势,70kg以后变化不大并维持在一个较低水平上;总体上来看,莱芜猪肌肉组织LPL基因表达量略高于鲁莱黑猪(P>0.05);相关分析表明:在两猪种中LPL基因的mRNA表达的发育性变化与肌内脂肪含量之间均不显著(P>0.05),但与肌内脂肪的相对含量(肌内脂肪/体脂量)分别呈显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)正相关。两个猪种肌肉组织的HSL基因表达的发育性变化相似,随着体重增加,HSLmRNA表达呈下降趋势;莱芜猪在60kg以后HSL基因的mRNA含量急剧下降,然后又有所回升,鲁莱黑猪在60kg以后HSLmRNA表达呈缓慢下降趋势,两个猪种相比较,在60-80kg阶段鲁莱黑猪HSL基因的表达量显著高于莱芜猪(P<0.05);相关性分析发现,莱芜猪和鲁莱黑猪HSLmRNA表达的发育性变化与肌内脂肪含量均呈显著负相关(P<0.05)。结果提示:(1)LPLmRNA丰度对于正向调节肌内脂肪含量具有一定的影响;(2)HSL作为脂肪分解的关键酶在向下调节肌内脂肪含量方面具有重要的作用。 PCR-RFLP的研究结果发现,LPL基因第五内含子所扩增片段内有一个G→C的突变。在本试验所检测的四个品种猪中都含有A、B两种等位基因,其分布存在显著的品种差异。肥胖度极高的莱芜猪A型等位基因频率较高,国外瘦肉型猪种大白猪的B型等位基因频率较高。LPL基因第五内含子的这一突变对肌内脂肪等肉质性状的影响值得进一步研究。

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