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论文说明:英文缩略词及中文对照表
声明
第一章文献综述
引言
1辣椒疫病的研究进展
1.1辣椒疫病的发生危害情况
1.2辣椒疫病发生规律和发病条件
1.3辣椒疫霉及其生物学特性
1.4辣椒疫霉的生理分化
1.5辣椒疫病的防治
2植物病原真菌致病基因的研究进展
2.1与侵染结构产生有关的基因
2.2与细胞壁降解有关的基因
2.3与寄主代谢反应产物有关的基因
2.4毒素基因
2.5与信号传导有关的基因
2.6其它功能的致病基因
3植物病原菌细胞壁降解酶的研究现状
3.1细胞壁降解酶的分类
3.2植物细胞壁降解酶的抑制子
4果胶酶的研究进展
4.1果胶酶的分类
4.2果胶酶在致病过程中的作用
4.3微生物果胶酶基因
4.4果胶酶活力的检测方法
5果胶甲基酯酶的研究进展
5.1果胶甲基酯酶的存在与来源
5.2果胶甲基酯酶的基本生物学特征
5.3果胶甲基酯酶的性质与作用机理
5.4果胶甲基酯酶的活性
5.5植物中果胶甲基酯酶的研究进展
5.6果胶甲基酯酶在植物病原菌中的研究
5.7果胶甲基酯酶异源表达的研究
6蛋白糖基化的研究进展
6.1糖基化位点的功能
6.2糖基化位点的识别方法
6.3糖基化蛋白的去糖基化
7利用酵母体系表达异源蛋白的研究进展
7.1酵母表达体系的优点
7.2毕赤酵母表达体系
8重组蛋白纯化的研究进展
8.1多聚精氨酸一标签(Arg-tag)
8.2多聚组氨酸一标签(His-tag)
8.3 FLAG-标签
8.4谷胱甘肽S-转移酶标签
8.5 s-标签
8.6 SBP-标签
选题目的及意义:
第二章强致病辣椒疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶、果胶甲基酯酶、果胶裂解酶活性测定
1材料与方法
1.1材料
1.2方法
2结果与分析
2.1强致病辣椒疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶活性比较
2.2强致病辣椒疫霉菌果胶甲基酯酶活性比较
2.3强致病辣椒疫霉菌果胶裂解酶活性比较
2.4粗酶液接种辣椒后发病面积比较
3讨论
第三章辣椒疫霉果胶甲基酯酶基因克隆及序列分析
1材料与方法
1.1材料
1.2实验方法
2结果与分析
2.1.辣椒疫霉菌果胶甲基酯酶pcpme1基因的克隆及其序列分析
2.2辣椒疫霉菌果胶甲基酯酶pcpme2基因的序列及结构分析
2.3辣椒疫霉菌果胶甲基酯酶pcpme3基因的序列及结构分析
2.4辣椒疫霉菌果胶甲基酯酶pcpme4基因的序列及结构分析
2.5辣椒疫霉菌果胶甲基酯酶pcpme5基因的序列及结构分析
2.6辣椒疫霉5个果胶甲基酯酶基因的比较
2.7辣椒疫霉菌果胶甲基酯酶基因在自然界中的进化分析
3讨论
3.1辣椒疫霉果胶甲基酯酶基因的序列特征
3.2辣椒疫霉果胶甲基酯酶酶基因家族的生物学意义
3.3辣椒疫霉果胶甲基酯酶基因与其它PMEs的关系
第四章辣椒疫霉菌果胶甲基酯酶基因在寄主体内的表达
1材料与方法
1.1材料
1.2方法
2结果与分析
2.1 RT-PCR扩增结果
2.2 Northern Blot分析
3讨论
第五章辣椒疫霉菌果胶甲基酯酶pcpme1基因的体外表达、纯化及其活性位点的定点突变
1 pcpme1基因的体外表达、纯化
1.1材料
1.2实验方法
2 pcpme1基因活性位点的定点突变
2.1试剂材料
2.2pcpme1基因活性位点的确定
2.3定点突变
3结果与分析
3.1果胶甲基酯酶基因pcpme1在毕赤酵母中的表达
3.2 PCPME1融合蛋白的纯化
3.3纯化蛋白的去糖基化
3.4兔抗血清的制备
3.5 pcpme1的定点突变
4讨论
4.1表达系统的选择
4.2外源基因在Pichiapastoris中的分泌表达的必要性
4.3影响外源基因表达量的因素
第六章辣椒疫霉果胶甲基酯酶PCPME1及其突变体对辣椒细胞壁的降解
1材料与方法
1.1材料
1.2方法
2结果与分析
3讨论
结论与建议
1结论
2建议
参考文献
致谢
攻读学位期间发表论文情况