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茼蒿甲醇提取物水萃取组分对南方根结线虫活性成分研究

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论文说明:缩略词及中英文对照

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1引言

1.1根结线虫的发生与危害

1.2根结线虫的防治现状

1.2.1农业防治

1.2.2物理防治

1.2.3抗病育种

1.2.4生物防治

1.2.5微生物源及植物源农药防治

1.2.6化学防治

1.3化学杀线虫剂的发展与现状

1.3.1杀线虫剂的研究现状

1.3.2杀线剂的种类

1.4植物源杀线虫化合物研究概况

1.5茼蒿研究概况

1.6本研究的目的意义

2材料与方法

2.1试验材料与仪器

2.1.1供试材料

2.1.2主要仪器

2.2植物提取物的制备

2.2.1冷浸法制备提取物

2.2.2闪式提取法制备提取物

2.3茼蒿甲醇提取物不同萃取组分对南方根结线虫发育的影响

2.3.1茼蒿甲醇提取物不同萃取组分的制备

2.3.2茼蒿甲醇提取物不同萃取组分对南方根结线虫胚胎发育的影响

2.3.3茼蒿甲醇提取物不同萃取组分对南方根结线虫胚后发育的影响

2.4茼蒿活性成分的提取分离

2.4.1茼蒿活性成分的初步分离

2.4.2硅胶柱层析分离

2.4.3中压制备液谱分离

2.4.4化合物结构鉴定

2.5室内毒杀活性测定方法

3结果与分析

3.1冷浸法与闪式提取法制备茼蒿甲醇提取物及对南方根结线虫的活性

3.2水与甲醇制备苘蒿提取物及对南方根结线虫的活性

3.3茼蒿甲醇提取物不同萃取组分对南方根结线虫发育的影响

3.3.1茼蒿甲醇提取物不同萃取组分对南方根结线虫胚胎发育的影响

3.3.2茼蒿甲醇提取物不同萃取组分对南方根结线虫胚后发育的影响

3.4茼蒿甲醇提取物水萃取组分活性成分的追踪与分离纯化

3.4.1茼蒿甲醇提取物水部成分分离与活性检测

3.4.2 A2组分的成分分离和化合物H1的纯化

3.4.3 A9组分的成分分离和化合物H2的纯化

3.5化合物结构鉴定

3.5.1化合物H1的结构鉴定

3.5.2化合物H2的结构鉴定

4讨论

5结论

6本论文创新之处

7参考文献

8致谢

9攻读学位期间发表论文情况

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摘要

为寻找环境友好杀线虫剂,本文以南方根结线虫为靶标,采用室内离体生物活性测定的方法,对茼蒿甲醇提取物水萃取组分中杀线虫成分进行了研究,以期为环境友好杀线虫剂的研究与开发提供理论依据。结果如下: 1.冷浸法与闪式提取法两种提取方法的提取率及提取物的杀线虫活性间均不存在显著性差异。闪式提取法可以代替冷浸法进行苘蒿中杀线虫活性物质的提取。 2.水与甲醇两种不同提取溶剂的提取率及提取物的杀线虫活性间均存在显著性差异。虽然茼蒿中杀线虫活性物质存在于甲醇提取物的水萃取组分中,但是不能用水来替代甲醇做为提取溶剂。 3.1%茼蒿甲醇提取物五种萃取组分对南方根结线虫胚胎发育抑制作用由强到弱的排列顺序为:水萃取组分>正丁醇萃取组分>三氯甲烷萃取组分>乙酸乙酯萃取组分>石油醚萃取组分,抑制作用表现在群体发育进程与对照相比相对滞后。1%茼蒿甲醇提取物水萃取组分处理后264h,仅有15%的卵完成胚胎发育。 4.1%茼蒿甲醇提取物五种萃取组分对南方根结线虫胚后发育抑制作用由强到弱的排列顺序为:水萃取组分>正丁醇萃取组分>三氯甲烷萃取组分>乙酸乙酯萃取组分,石油醚萃取组分,抑制作用表现在能推迟南方根结线虫胚后发育进程。这种抑制主要表现在对二龄幼虫和雌成虫的影响,而对三龄幼虫和四龄幼虫未表现明显影响。萃取组分对线虫胚后发育的影响还表现在推迟初侵染期、降低雌成虫产卵量及推迟初产卵日。各萃取组分以水萃取组分的效果最好,能使胚后发育历程、初侵染、初产卵日分别推迟4、5、9d,雌虫产卵量显著降低。 5.通过生物活性追踪的方法首次对茼蒿甲醇提取物水萃取组分中对南方根结线虫具有活性的物质进行了系统研究。采用硅胶柱层析和制备液相色谱等技术从中分离得到两个化合物。采用核磁共振和红外色谱等技术,结合相关文献确定了相关化合物的结构。结构解析结果表明:化合物H1为小白菊内酯;H2为金丝桃甙。H1和H2均为首次从茼蒿中分离得到。

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