葡萄糖-胰岛素对奶山羊乳脂合成关键酶基因的影响

摘要

本课题包括两个试验，分别通过真胃灌注葡萄糖和建立高胰岛素-正葡萄糖钳夹处理，并通过测定乳成分，血液相关指标和乳脂合成相关基因mRNA表达水平来研究葡萄糖，胰岛素对乳脂合成的影响，探索日粮因素引起的乳脂降低MFD的发生机制。
　　 试验一:4只安装真胃瘘管和颈动脉游离的泌乳期的崂山奶山羊，采用2×2交叉试验设计，设置对照和试验两个处理组，对照处理灌注生理盐水，试验处理灌注葡萄糖200g/d，测定其乳成分，血液指标和乳腺组织中脂质合成相关基因mRNA表达量。结果表明:①真胃灌注葡萄糖200g/d使产奶量显著升高(P＜0.05)。乳脂率显著降低(P＜0.05)，与对照组相比降低了33％，乳糖含量显著降低(P＜0.05)，而乳蛋白，非脂固形物(SNF)含量无明显变化;乳脂日产量显著降低(P＜0.05)，下降了24.2％，乳糖产量显著升高(P＜0.05)，其他乳成分产量没有显著变化;②灌注葡萄糖200g/d试验组的血糖水平显著高于对照组(P＜0.05），而血浆胰岛素水平变化没有达到显著水平，但有升高趋势(P=0.06);③与对照组相比，灌注葡萄糖200g/d处理组从头合成的脂肪酸(C4∶0-C14∶1)和两种来源的C16∶0+C16∶1的含量虽无显著变化，但有升高趋势(0.05＜P＜0.1);而长链脂肪酸（≥C16）的含量显著降低(P＜0.01)并且日产量也显著降低（P＜0.05）;④与对照组相比，灌注葡萄糖200g/d试验组的乳腺组织中乳脂合成的关键酶:乙酰辅酶A羧化酶(ACC)，脂肪酸合成酶(FAS)，脂蛋白酯酶(LPL)，脂肪酸结合蛋白(H-FABP)，GPAT，SCD的mRNA的表达水平没有显著变化。
　　 试验二:本试验选用3只泌乳后期的崂山奶山羊，通过静脉注射葡萄糖和胰岛素，建立高胰岛素-正葡萄糖钳夹处理，胰岛素的灌注量为120ug/h。试验期分为对照期，恢复期，试验处理期（试验处理12个小时）和试验完成后期四个阶段。结果表明:①高胰岛素-正血糖钳夹试验处理期血糖水平无显著变化，而胰岛素显著升高(P＜0.01)。②高胰岛素-正血糖钳夹处理对产奶量没有显著影响，与对照期相比，试验处理期乳脂率，乳蛋白和非脂化固形物(SNF)含量均显著降低(P＜0.01)，乳脂产量也显著降低(P＜0.01)，胰岛素钳夹结束后，乳脂率和乳脂产量逐渐升高，钳夹结束后12h、24h乳脂率和乳脂产量与胰岛素钳夹处理期相比变化不显著，但与对照相比仍显著降低(P＜0.01)，而钳夹结束后36h、48h乳脂率和乳脂产量与胰岛素钳夹处理期相比显著升高（P＜0.01），但与对照期相比无显著变化。③与对照相期比，高胰岛素-正血糖钳夹试验处理期从头合成的脂肪酸(C4∶0-C14∶1)和长链脂肪酸(≥C16)的产量均显著降低(P＜0.01，P＜0.05)，胰岛素钳夹结束后C4∶0-C14∶1脂肪酸和长链脂肪酸(≥C16)日产量均逐渐上调;不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸的比例（C14∶1/C14∶0;C16∶1/C16∶0等）较对照期，胰岛素钳夹处理期和钳夹结束后12h均显著升高(P=0.05，P＜0.01)。④与对照期相比，血糖钳夹处理期和处理后期(48h)乳腺组织中乳脂合成关键酶蛋白:ACC、FAS、LPL、H-FABP、SCD的mRNA的表达水平均没发现显著变化。
　　 综合分析，对奶山羊真胃灌注葡萄糖和进行高胰岛素-正血糖钳央处理虽未对乳腺组织中乳脂合成的关键酶基因有显著影响，但是均降低了乳脂率和乳脂产量，改变了乳脂肪酸组分，而胰岛素的主要作用是减少了长链脂肪酸的数量而导致乳脂降低。

目录

声明

英文缩略表

摘要

前言

1．1 反刍动物乳脂概述

1．1．1 反刍动物乳脂的组成

1．1．2 反刍动物乳脂的来源

1．2 调控乳脂合成及分泌的关键酶基因概述

1．2．1 乳脂合成前体的吸收和转运

1．2．2 脂肪酸内源合成

1．2．3 脂肪酸的去饱和

1．2．4 甘油三酯合成

1．2．5 胰岛素对脂质合成基因表达的调节

1．3 乳脂降低的研究

1．3．1 乳脂降低(MFD)的特点

1．3．2 乳脂降低机制的研究

1．4 高胰岛素—正血糖钳夹技术在奶山羊中建立及应用

1．5 研究目的

2．研究内容

2．1 试验一：真胃灌注葡萄糖对奶山羊乳脂合成及相关酶蛋白基因的影响

2．1．1 试验目的

2．1．2 材料与方法

2．1．3 结果与分析

2．1．4 讨论

2．2 试验二 高胰岛素-正葡萄糖钳夹对奶山羊乳脂合成及乳腺组织中乳脂合成关键酶基因的影响

2．2．1．试验目的

2．2．2．试验材料和方法

2．2．3．结果与分析

2．2．4．讨论

3．总体结论与展望

3．1．试验结论

3．2 研究展望

参考文献

附录

致谢