牛磺鹅去氧胆酸对抗地塞米松致小鼠脑损伤的组织病理学影响

摘要

糖皮质激素类药物因为其具备良好的抗炎、抗过敏和抗内毒素等药理作用，被广泛应用于兽医和人医的临床上。但近些年发现该类药物对神经系统可产生严重的不良反应，包括脊髓梗死、皮质盲、中风、癫痫、神经损伤、脑水肿和死亡等。最近美国食品药品监督管理局局(FDA)要求在糖皮质激素注射剂标签中加入这些新的警告内容。因此寻找一类可以减轻或对抗糖皮质激素类不良反应的药物变得越为重要。胆汁酸及其有效成分的研究一直是国内外研究的热点领域之一。、牛磺鹅去氧胆酸(Taurochenodeoxycholic Acid，TCDCA)是胆汁酸中一种重要有效成分，以往研究发现其能够对小鼠机体下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)有调节作用，并能对抗地塞米松不良反应。在以往研究工作的基础上，本课题采用大剂量地塞米松(Dexamethasone，DEX)给药制备小鼠脑组织损伤模型，并同时灌服TCDCA，通过对其大脑内各个部位的组织学观察，了解大剂量糖皮质激素类药物对脑各区域损伤情况，并探讨TCDCA能否在小鼠脑内对抗地塞米松不良反应，为今后将其用于减轻糖皮质激素类药物不良反应或开发成为脑组织保护性药物提供依据。本论文主要研究内容及结果如下:
　　将200只小鼠，雌雄各半，随机分为10组，即正常组，不同剂量DEX诱导的三个模型组，其中DEX的给药剂量分别为20mg/kg、40mg/kg和80mg/kg，对每种剂量DEX模型组又设高、低TCDCA两个模型给药组，其中TCDCA高、低给药剂量分别为50mg/kg、100mg/kg。DEX采用腹腔注射给药方式，TCDCA口服给药，二者同时给药，连续给药7天。采用HE染色法检测小鼠大脑皮层、胼胝体、海马、第三脑室脉络丛、丘脑、下丘脑各区域的病理组织变化。病理图片显示:在大脑皮层区，与正常对照组相比，20mg/kg剂量DEX模型组皮层区出现细胞皱缩、水肿并伴有内皮细胞肿胀现象，具体表现为细胞周围有空隙、血管周间隙增宽;40mg/kg地塞米松模型组皮层区出现水肿，严重淤血现象;80mg/kg剂量下地塞米松模型组皮层区出现淤血，水肿。低剂量给药组和高剂量给药组皮层区淤血、水肿现象均有所减轻，其中高剂量给药组更为显著。在胼胝体区，与正常对照组相比，各剂量DEX模型组与各剂量TCDCA给药组的胼胝体均无显著变化。在海马区，与正常对照组相对比，20mg/kg地塞米松模型组海马体内出现水肿现象，并伴随有淤血形成;低剂量给药组海马体淤血减轻，但还有轻微水肿;高剂量模型给药组海马体内淤血、水肿消失，基本恢复正常。各组的海马齿状回细胞均无显著差别。40mg/kg剂量下地塞米松模型组海马体内出现大量淤血、水肿，细胞出现皱缩，海马齿状回细胞轮廓模糊，界限不明显，着色变浅，空泡增多，有的核仁消失形态，一些细胞处于崩解状态;低剂量给药组淤血消失，水肿减弱，但其海马齿状回细胞依旧空泡化明显，细胞界限模糊，着色较浅;高剂量给药组淤血、水肿消失并且海马齿状回细胞恢复正常。80mg/kg剂量下地塞米松模型组海马体内出现大量淤血、水肿现象，海马齿状回有的细胞核仁形态消失，出现空泡化，轮廓模糊，界限不明显处于崩解状态;低剂量给药组细胞与高剂量给药组海马体内水肿、淤血和细胞空泡化现象均有所减轻，但其细胞轮廓依旧模糊，界限不明显;高剂量给药组更为恢复效果较显著，其海马齿状回细胞空泡化消失，核仁明显，轮廓清晰，恢复正常水平。在第三脑室脉络丛区，与正常对照组相对比，20mg/kg剂量下的地塞米松模型组、低剂量给药模型组和高剂量模型给药组的脉络丛在组织结构方面差异不大，细胞形态正常;40mg/kg地塞米松模型组脉络丛形态结构上无显著变化，但低剂量给药组和高剂量给药组脉络丛血管周间隙均所扩张，出现水肿，其中高剂量给药组更为严重;80mg/kg地塞米松模型组脉络丛出现明显水肿，表现为血管间隙增宽;低剂量给药组与高剂量给药组脉络丛血管间隙均有所恢复，其中以高剂量给药组效果更为显著。在丘脑区，与正常对照组相对比，20mg/kg地塞米松模型组丘脑内出细胞皱缩、水肿现象;80mg/kg地塞米松模型组丘脑内出现淤血，细胞皱缩现象;80mg/kg地塞米松模型组丘脑内出现水肿，血管周隙明显增宽;各模型组的低剂量给药组与高剂量模给药组丘脑区血管周隙均恢复正常、水肿均有所减轻，其中高剂量给药组效果更为显著。在下丘脑区，与正常对照组相对比，20mg/kg地塞米松模型组下丘脑内出现轻微水肿现象;40mg/kg地塞米松模型组下丘脑内出现水肿，表现为血管周隙增加;80mg/kg地塞米松模型组下丘脑内出现严重瘀血。低剂量给药组与高剂量给药组丘脑内瘀血均消失，组织均恢复正常。
　　综上所述，本课题可得出如下结论:大剂量的地塞米松对小鼠脑组织造成的损伤主要表现为淤血、水肿、细胞皱缩，其损伤主要部位出现在大脑皮层、海马、丘脑和下丘脑部位。牛磺鹅去氧胆酸能够有效的对抗地塞米松对小鼠大脑造成的不良反应，其中TCDCA的给药剂为100mg/kg时的效果更为显著。