山东省猪圆环病毒病的血清学调查及PCV2分离株的遗传变异分析

摘要

为了解山东省猪群中猪圆环病毒(PCV)的感染情况，本研究于2013年3月～2014年2月期间，对山东省6个未接种猪圆环病毒疫苗的规模化猪场进行血清学调查，采集不同年龄阶段猪血清用ELISA方法检测猪圆环病毒2型(PCV2)抗体，抗体阳性率均在90.0％以上;为排除母源抗体的干扰，又采用PCR的方法对哺乳仔猪及刚断奶仔猪进行抗原检测，哺乳仔猪（1～3周龄）抗原阳性率为1.67％，4、5、6、7周龄抗原阳性率分别为16.67％、33.33％、50.0％、50.0％。表明山东省PCV2感染已极为普遍，种猪抗体阳性率达100％;哺乳仔猪可从母猪获得母源抗体，且抗体水平随日龄的增加呈现先降低后升高的趋势，伴随抗体水平的降低和升高，抗原阳性率也逐渐升高。
　　对4个已接种商品化猪圆环病毒疫苗的规模化猪场进行血清学调查，抗体阳性率分别为99.1％、96.0％、94.4％、89.4％，PCR方法检测其抗原，阳性率分别为13.6％、10.9％、20.0％、13.8％。表明现有疫苗的保护效果参差不齐，保护率均在90.0％以下，但PCV2抗原阳性率显著低于未免疫猪群。
　　将获得的7株猪圆环病毒Ⅱ型山东株全基因组进行克隆和鉴定，测序后登录于GenBank中，登录号分别为KJ511870、KJ511871、KJ511872、KJ511873、KJ511874、KJ511875、KJ511876，与已发表的16株国内外PCV2毒株进行序列比较。结果表明:山东省内7株流行毒株同源性非常高，为96.3％～99.8％;与国内参考毒株的同源性为94.4％～99.8％;与国外参考毒株的同源性为94.0％～98.6％。绘制系统发育进化树可以看出，所获得的7株全基因组序列中有6株属于PCV2d亚型，且均与山东参考株AY556473同属于一个大分支;仅KJ511874一株属于PCV2b基因亚型，与河南株、法国株遗传距离较近。由此说明山东省内流行毒株遗传关系较近，且PCV2d亚型处于主导地位，PCV2b亚型次之。