高速逆流色谱分离纯化岩白菜素等高极性化合物的研究

摘要

天然产物中的活性成分，按照其极性可以分为低极性、高极性和中等极性。其中高极性活性成分在高速逆流色谱体系中易偏水相，从而达不到理想的分离效果，一直以来都是制约天然产物中高极性活性成分分离纯化的瓶颈问题。本研究以矮地茶中岩白菜素、白芍中芍药苷、丹参中丹酚酸B和紫锥菊中菊苣酸4种高极性化合物为例，探讨高极性化合分离纯化的高速逆流色谱溶剂体系，研究高速逆流色谱（无机盐溶液）体系和石油醚-乙酸乙酯-正丁醇-水pH-区带逆流色谱体系在天然产物中高极性活性成分高速逆流色谱制备型分离纯化的应用，为高极性化合物的高速逆流色谱分离纯化提供一种普适性的高速逆流色谱溶剂体系。其主要结果和结论如下:
　　1.以石油醚-乙酸乙酯-正丁醇-1％ Na2SO4(1∶2∶2∶3，v/v)为两相溶剂体系，在流速为2.0 ml/min，主机转速为850 r/min，检测波长为254 nm的条件下进行分离，从2.00 g矮地茶粗提物中一次性分离制备得到320.30 mg岩白菜素，高效液相色谱分析其纯度为96.59％，通过质谱、核磁共振氢谱和核磁共振碳谱鉴定化合物的结构。
　　2.以正丁醇-乙酸乙酯-5％ Na2SO4(4∶1∶5，v/v)为两相溶剂体系，在流速为2.0 ml/min，主机转速为800 r/min，检测波长为254 nm的条件下进行分离，从100.00 mg芍药粗提物中一次性分离制备得到56.13mg芍药苷，高效液相色谱分析其纯度为98.67％，通过质谱、核磁共振氢谱和核磁共振碳谱鉴定化合物的结构。
　　3.以石油醚-乙酸乙酯-正丁醇-水(2∶3∶6∶9，v/v)为两相溶剂体系，在流速为2.0ml/min，主机转速为850 r/min，检测波长为254 nm的条件下进行分离，从6.00 g丹参粗提物中一次性分离制备得到1419.15 mg丹酚酸B，171.25 mg迷迭香酸和52.34 mg紫草酸单甲酯，高效液相色谱分析其纯度分别为94.53％、96.36％和96.83％，通过质谱、核磁共振氢谱和核磁共振碳谱鉴定化合物的结构。
　　4.以石油醚-乙酸乙酯-正丁醇-水(1∶4∶2∶5.5，v/v)为两相溶剂体系，在流速为2.0ml/min，主机转速为850 r/min，检测波长为254 nm的条件下进行分离，从4.00 g菊苣酸粗提物中一次性分离得到217.62 mg菊苣酸，高效液相色谱分析其纯度为98.31％，通过核磁共振氢谱和核磁共振碳谱鉴定化合物结构。
　　通过对上述4种高极性化合物的高速逆流色谱分离纯化，确定了筛选优化高速逆流色谱（无机盐溶液）溶剂体系和石油醚-乙酸乙酯-正丁醇-水pH-区带逆流色谱溶剂体系所需的无机盐种类、浓度和各溶剂比例调整的一般方法步骤和规律，且这些体系适合高极性化合物的制备型分离纯化，为高极性化合物的分离纯化提供了新的思路和理论依据，具有重要的意义。